英文名稱(chēng)：Human trypsinogen activation peptide,TAP ELISA Kit      

檢測(cè)方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 

人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA相關(guān)介紹：

一、標(biāo)本要求 

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 

2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

二、注意事項(xiàng)

1.此試劑為體外檢測(cè)試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號(hào)的試劑不能混用。

2.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘。

3.濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。

4.濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。

5.若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本可存放于2～8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本-20℃保存，避免反復(fù)凍融。

6.在反復(fù)清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低精確度，造成吸光度偏離的假像。

7.加樣完畢后，應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條，以便使孔中的液體充分混勻。

8.試劑盒保存于2～8℃，請(qǐng)勿冷凍，有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。

三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。

2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等。

3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液。

4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液。

5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品，按照1：100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。

人胰蛋白酶原激活肽（TAP）ELISA操作步驟：

1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）。

2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照50µl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40µl，然后再加待測(cè)樣品10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50µl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50µl，再加入顯色劑B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10.終止：每孔加終止液50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
屎腸球菌 Enterococcus faecium
殺鮭氣單胞菌 Aeromonas salmonicida
植物乳桿菌 Lactobacillus plantarum
圓弧青霉 Penicillium cyclopium
戊糖乳桿菌 Lactobacillus pentosus
乳酸乳球菌乳亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis
溶藻弧菌 Vibrio alginolyticus
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
青春雙歧桿菌 Bifidobacterium adolensentis
普雷恩毛霉 Mucor prainii
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
印第安那亞種 Bacillus thuringiensis subsp. indiana
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
臘狀芽胞桿菌 Bacillus cereus
枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna