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小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒操作步驟

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產品型號

品       牌R&D/美國

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2017-03-13 10:09:50瀏覽次數:299次

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用途:本試劑盒僅供科研使用,定量檢測細胞液、體液、組織、血清、血漿等標本小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒操作步驟的含量。

小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱:Mouse 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit       檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質量問題,收貨后十五個工作日內包退換。 
英文名稱:Mouse 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit  
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或 者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀,應再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數,把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設標準 品組(個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設置復孔。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內于 37℃恒溫孵育 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標板 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 液 50ul 后,再加入顯色劑 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復性。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應。
5. 建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應對樣品進行稀釋,計算結果時乘以相應的稀釋倍數。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經銷商, 如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調換,但概不承擔產品本身以外的任何損失。
小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

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TQ2 CPGTide Quencher 2 CPG [TQ2 CPG] 500

無水鈣(2.5KGCalcium Chloride, Anhydrous, CAS# 10043-52-4; 96%

七水硫鎂(1KGMagnesium Sulfate, 7H2O CAS# 10034-99-8; 98%

蔗糖(500GMSucrose, CAS# 57-50-1

CytoCalcein 紫羅蘭500 450nm處激發(fā)CytoCalcein Violet 500 Excited at 405 nm

7-甲氧基香豆素-4-乙, 琥珀酰亞胺酯MCA succinimidyl ester [7-Methoxycoumarin-4-acetic acid succinimidyl ester]

N-FMOC-乙二胺N-FMOC-cadaverine

7-羥基吩惡嗪酮乙(乙氧基試鹵靈)Resorufin ethyl ether

鈣離子熒光探針腔腸素 n 超級純Coelenterazine n UltraPure grade

trFluor Tb琥珀酰SEtrFluor Tb succinimidyl ester

DiSBAC30111DiSBAC30111

Texas Red疊氮化物Texas Red azide

MycoLight Green JJ98[綠色熒光核染料]MycoLight Green JJ98

HC-030031 50 mg1,2,3,6-tetrahydro-1,3-dimethyl-N-[4-1-methylethylphenyl]-2,6-dioxo-7H-purine-7-acetamide; HC-030031

25H-NBOMe imine analog 5 mg)(E-2-2,5-dimethoxyphenyl-N-2-methoxybenzylideneethanamine; 25H-NBOMe imine analog

GSK264220A 25 mgN-[2-methyl-5-1-piperidinylsulfonyl-3-furanyl]-N-phenyl-urea; GSK264220A

Tenovin-1 10 mgN-[[[4-acetylaminophenyl]amino]thioxomethyl-4-1,1-dimethylethyl]-benzamide Tenovin-1

小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒操作步驟Gefitinib 1 gN-3-chloro-4-fluorophenyl-7-methoxy-6-[3-4-morpholinylpropoxy]-4-quinazolinamine; ZD1839|Iressa

thio-m-Toluthioamide 5 g3-methyl-benzenecarbothioamide; 3-Methylbenzenethioamide; thio-m-Toluthioamide

Bisindolylmaleimide IV 1 mg34-di-1H-indol-3-yl-1H-pyrrole-25-dione; Arcyriarubin A|BIM IV Bisindolylmaleimide IV

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