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上海谷研實業(yè)有限公司
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當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>核酸擴增>> 20μL×400次PCR MasterMix

PCR MasterMix

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號20μL×400次

品       牌R&D/美國

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-22 14:22:27瀏覽次數(shù):355次

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供貨周期 現(xiàn)貨 貨號 GOY-F10284
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研使用
PCR MasterMix公司正*的各種產(chǎn)品細(xì)胞GRK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織GRK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞GRK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織GRK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞SPHK激酶總活性定量檢測試劑盒(A/B/C)

DNA提取流程圖:

QQ截圖20220414142532.png

下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

貨號

PCR MasterMix

PCR MasterMix

20μL×400

GOY-F10284

產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

本制品中含有2×Taq DNA   Polymerase2×PCR Buffer,2×dNTP,只需加入適量引物、模板和水即可進行PCR擴增。大大簡化了PCR操作,使操作更加快捷,也減少了PCR操作過程中可能導(dǎo)致的污染,使PCR的重復(fù)性更好。

產(chǎn)品用途:

利用2×PCR Master Mix可以進行各種常規(guī)的PCR擴增,特別適合用于定性和半定量的PCR擴增,以及2kb以下DNA片段的T載體克隆。

產(chǎn)品特點:

本產(chǎn)品可以擴增出長達8kb的片段,但通常更適合用于擴增2kb以下的DNA片段。

本產(chǎn)品穩(wěn)定性高,經(jīng)測試,反復(fù)凍融15次后對PCR的擴增效果無顯著影響。

保存:-20℃,至少一年有效。

 

操作步驟:
1.
勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.
單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養(yǎng)板)1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNADNA污染。
c
.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2
.將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3
.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8
10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7.
把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8
10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
人α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP/α1M)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human AMBP (Alpha-1-Microglobulin/Bikunin Precursor) ELISA Kit  2-Iodo-3-oxo-4-azaandrostane-17-carboxylic acid  104239-97-6  中文名:  分子式:C19H28INO3 

T細(xì)胞活化連接蛋白elisa試劑盒   T細(xì)胞活化連接蛋白試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   T細(xì)胞活化連接蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人T細(xì)胞活化連接蛋白試劑盒、人T細(xì)胞活化連接蛋白elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。     Sitafloxacin  127254-12-0  中文名:西他  分子式:C19H18ClF2N3O3 

P糖蛋白elisa試劑盒   P糖蛋白試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   P糖蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人P糖蛋白試劑盒、人P糖蛋白elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。  Schleicheol 1  中文名:  分子式:C30H52O2 

preptinelisa試劑盒   preptin試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   preptin試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人preptin試劑盒、人preptin elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。  Sulfamonomethoxine   38006-08-5  中文名:磺胺間甲氧鈉  分子式:C11H11N4NaO3S  度:98.0%   

Pirin蛋白(PIR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human PIR (Pirin) ELISA Kit  2-Fluoroadenosine  146-78-1  中文名:  分子式:C10H12FN5O4
滅草煙,咪唑  Imazapyr acid  質(zhì)量規(guī)格:>98% Rat soluble leptin receptor (sLR) ELISA Kit 大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒

咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)  Imazapyr acid  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Humanadaptormoleculeapoptoticpeptidaseactivatingfactor1,APAF1ELISAKit 人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

石膽酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Lithocholic Acid  質(zhì)量規(guī)格:>97(GC),標(biāo)準(zhǔn)品 Humanai-hepatitisDvirusaibody,ai-HDVELISA試劑盒人抗丁型肝炎病毒抗體(ai-HDV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

氧嗪酸鉀  Potassium Oxonate  質(zhì)量規(guī)格:>98% 植物0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性比色法定量檢測試劑盒20

氧嗪酸鉀(標(biāo)準(zhǔn)品)  Potassium Oxonate  質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 HumanVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit人血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

異丁司特  Ibudilast  質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP-5 ELISA Kit

異丁司特(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ibudilast  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA檢測試劑盒Rathemeoxygenase2,HO-2ELISAKit 96T/48T

吉西他濱  Gemcitabine  質(zhì)量規(guī)格:>98%,free base 0酸化微管相關(guān)蛋白tau(hyper phosphorylated MAPT)試劑盒 Human hyper phosphorylated MAPT ELISA kit

沙利度胺(反應(yīng)停)  Thalidomide   質(zhì)量規(guī)格:>98% RatThioredoxin,xELISAKit大鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

沙利度胺(標(biāo)準(zhǔn)品)  Thalidomide   質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 LAMBDA噬菌體DNA氯化銫化試劑盒10
PCR MasterMix
細(xì)菌胱硫醚-γ-合成酶(cystathionine γ-synthase;CGS)活性熒光定量檢測試劑盒

組織胱硫醚-γ-合成酶(cystathionine γ-synthase;CGS)活性熒光定量檢測試劑盒

細(xì)胞胱硫醚-γ-合成酶(cystathionine γ-synthase;CGS)活性熒光定量檢測試劑盒

植物胱硫醚-γ-合成酶(cystathionine γ-synthase;CGS)活性比色法定量檢測試劑盒

真菌/酵母胱硫醚-γ-合成酶(cystathionine γ-synthase;CG

實驗步驟
(1)
實驗開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65
水浴3-10 min,期間混勻2-3
(4)
加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4
離心20min
(8)
棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V體積的無水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
離心20 min
(12)
棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC處理水溶解
(14)
用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(
在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))


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