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果膠裂解酶微量法測(cè)試盒

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-03-21 15:24:35瀏覽次數(shù):307次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/48樣
貨號(hào) GOY-01S7006 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅用于科研
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產(chǎn)品名稱:果膠裂解酶微量法測(cè)試盒
規(guī)格100/48
測(cè)試方法微量法
貨號(hào):GOY-01S7006
分類:光合作用系列
商品介紹:
果膠裂解酶(EC4.2.2.10)是果膠酶的重要組成部分,是一種能降解植物細(xì)胞壁,導(dǎo)致植物組織軟化甚至死亡的解聚酶,來(lái)源比較廣泛,主要來(lái)源于微生物,可用于果汁、果酒的澄清,提高水果出汁率,植物病毒的純化,紙漿的漂白和紡織品的生物精煉,在減少環(huán)境污染和降低能源消耗方面具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。

測(cè)定原理:

果膠裂解酶作用于果膠中的α-1,4糖苷鍵,生成在還原端C4C5之間位置具有不飽和鍵的不飽和寡聚半乳糖醛酸,在235nm處有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

天平、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿、恒溫水浴鍋。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4保存;
測(cè)定步驟
1
、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2
將試劑一、二、三37(哺乳動(dòng)物)25(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3
、 加樣表:

圖2.jpg

樣本的前處理
FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后48000g離心10min,取上清測(cè)定。
胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)1510的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4,200g離心5min,棄沉淀,取上清在48000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后48000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟提取粗酶液。
0酸化FMS樣激酶3抗體     0酸激酶α1抗體

肢體畸形相關(guān)蛋白FMN1抗體     0酸激酶1抗體

單加氧酶3抗體     0酸肌醇相互作用蛋白抗體

單加氧酶5抗體     0酸肌醇0脂酶PLCZ1抗體

0酸化脆性X綜合征相關(guān)蛋白AFF1抗體     0酸肌醇0酸酶蛋白INPP5抗體
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果膠裂解酶微量法測(cè)試盒粉紅木霉   瑞士乳桿菌

葡酒色被孢霉   金黃色葡萄球菌金黃亞種

蘇云金芽胞桿菌托馬諾夫亞種Bacillusthuringiensissubsp.toumanoffii   馬其頓假絲酵母

糞腸球菌ATCC29212凍干粉   銅綠假單胞菌凍干粉

孔雀石綠鏈霉菌   構(gòu)巢裸胞殼
FBP活性計(jì)算:
1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP
nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP
nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W ×V÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V
反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;εNADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mLT:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。


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