蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant High Temperature Requirement Factor A1 (HTRA1)

HtrA; L56; ORF480; PRSS11; HtrA Serine Peptidase 1; Protease,Serine,11; IGFBP5-Protease; High-temperature requirement A serine peptidase 1

型號(hào)：GOY-01D03

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：47.2kDa

實(shí)際分子量：47kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Gly204~Leu364 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：6.6

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1)  產(chǎn)品名稱：醌NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1)  產(chǎn)品名稱：醌NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1)  產(chǎn)品名稱：醌NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Ribosomal Protein S6 Kinase Beta 1 (RPS6Kb1)  產(chǎn)品名稱：核糖體蛋白S6激酶β1(RPS6Kb1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Peptidase D (PEPD)  產(chǎn)品名稱：肽酶D(PEPD)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Peroxidasin Homolog (PXDN)  產(chǎn)品名稱：過氧蛋白同源物(PXDN)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

芳基酯酶B抗體 ARSB

腺苷A1A受體抗體 ADORA1

γ氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶抗體 ABAT

共濟(jì)失調(diào)蛋白2結(jié)合蛋白1抗體 A2BP1

腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)換酶 ADAM17

芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白2抗體 ARNT2

AlkB同源蛋白8抗體 ABH8

ABI基因家族成員3結(jié)合蛋白抗體 ABI3BP

含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族10抗體 ASB10

乙醛脫氫酶1蛋白家族L1抗體 ALDH1L1

Rho GTP酶激活蛋白20抗體 ARHGAP20

軸抑制蛋白2抗體 Axin 2

高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白人小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基武夷小單孢菌 Micromonospora wuyiensis

爪哇根霉 Rhizopus javanicus納豆芽胞桿菌 Bacillus natto

大鼠破骨細(xì)胞培養(yǎng)基HOS(人骨肉瘤細(xì)胞)

克魯斯假絲酵母 Candida krusei釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

BGC-803(人胃細(xì)胞)糙皮側(cè)耳 Pleurotus ostreatus

玫瑰產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces roseochromogenes褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum

無花果曲霉 Aspergillus ficuum爪哇根霉 Rhizopus javanicus

根瘤菌費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

BRL 3A, 大鼠肝正常細(xì)胞大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuiiU251人膠質(zhì)瘤細(xì)胞

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis毛霉屬 Mucor sp.

黃芪黃酮費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

爪哇根霉無花果曲霉變種 Aspergillus ficuum var.