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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白人

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-02 13:34:40瀏覽次數(shù):295次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D53 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)
物種 Homo sapiens (Human,人)
基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:人血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒96T 0.312-20 ng/mL人二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒96T 1.56-100 ng/mL人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒96T 7.8-500 ng/mL

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

英文名稱:Recombinant Microsomal Glutathione S Transferase 1 (MGST1)  產(chǎn)品名稱:微粒體S轉(zhuǎn)移酶1(MGST1)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

英文名稱:Recombinant Glutathione S Transferase Alpha 1 (GSTa1)  產(chǎn)品名稱:S轉(zhuǎn)移酶α1(GSTa1)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Glutathione S Transferase Alpha 1 (GSTa1)  產(chǎn)品名稱:S轉(zhuǎn)移酶α1(GSTa1)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

英文名稱:Recombinant Glutathione S Transferase Alpha 1 (GSTa1)  產(chǎn)品名稱:S轉(zhuǎn)移酶α1(GSTa1)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

英文名稱:Recombinant Amiloride Binding Protein 1 (ABP1)  產(chǎn)品名稱:二胺氧化酶(ABP1)重組蛋白物種:Sus scrofa; Porcine (Pig,豬)

英文名稱:Recombinant Amiloride Binding Protein 1 (ABP1)  產(chǎn)品名稱:二胺氧化酶(ABP1)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D53

 

 

產(chǎn)品名稱:基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白人

英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)

CLG3; Collagenase 3

型號(hào):GOY-01D53

酶與激酶

腫瘤免疫

骨骼代謝

風(fēng)濕病學(xué)

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::分泌, 細(xì)胞外基質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量:22.3kDa

實(shí)際分子量:25kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽:Glu103~Leu290 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):5.7

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 ARRDC1

心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體 ANKRD1

抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 ARRDC2

抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 ARRDC3

抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體 ARRDC4

雌二醇抗體 alpha Estradiol

淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體 APLP2

淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體 APLP1

卵巢、胎盤、前列腺、睪蛋白22抗體 ACTBL1

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白33B抗體 ANKRD33B

轉(zhuǎn)錄激活蛋白crsp70抗體 APC70

載脂蛋白C3抗體 APOC3

基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白人唐菖蒲青霉 Penicillium gladioli

貝葉多孔菌

苜蓿中華根瘤菌釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

NCI-H596(人肺腺鱗細(xì)胞)紅垂幕菇 Hypholoma cinnabarinum

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae串珠菌 Leuconostoc lactis

EDTA Buffer(50x)/EDTA 緩沖液(IHC抗原修復(fù)液, 50x)海氏腸球菌

紫色鏈霉菌 Streptomyces violaceus三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

中性(含10mL酶解緩沖液)桿菌屬 Lactobacillus sp.

奇異變形桿菌 Proteus mirabilis諾卡氏菌 Nocardia sp.

香菇 Lentinula edodes人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

植物桿菌 Lactobacillus plantarum屎腸球菌 Enterococcus faecium

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

 


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