蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)重組蛋白牛

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)

SL1; STMY; STMY1; STR1; Progelatinase; Stromelysin 1; Transin-1

型號(hào)：GOY-01D62

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

心腦血管

物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌, 細(xì)胞外基質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：56.3kDa

實(shí)際分子量：56kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Tyr18~Cys477 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：5.3

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Pyruvate dehydrogenase alpha 1 (PDHA1)  產(chǎn)品名稱：丙酮酸脫氫酶α(PDHA1)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Pyruvate dehydrogenase alpha 1 (PDHA1)  產(chǎn)品名稱：丙酮酸脫氫酶α(PDHA1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)  產(chǎn)品名稱：碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白物種：Chicken (Gallus，雞)

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)  產(chǎn)品名稱：碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Topoisomerase II (TOP2)  產(chǎn)品名稱：拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase)  產(chǎn)品名稱：堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

粘合連接相關(guān)蛋白1抗體 AJAP1

神經(jīng)細(xì)胞分化相關(guān)蛋白AHNAK抗體 AHNAK

去整合素樣金屬13抗體 ADAM13

聚集蛋白抗體 Agrin

轉(zhuǎn)錄因子AP2α+β抗體 AP2 alpha + beta

磷酸化腺瘤樣息肉抗體 phospho-APC (Ser2054)

磷酸化細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體 phospho-APC1 (Ser688)

細(xì)胞周期后期促進(jìn)蛋白亞基10抗體 APC10

腺瘤性結(jié)腸息肉病蛋白2抗體 APC2

磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白16抗體 phospho-APC6 (Thr580)

細(xì)胞周期后期促進(jìn)蛋白亞基11抗體 APC11

DNA修復(fù)酶相互作用蛋白抗體 APLF

基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)重組蛋白牛許旺酵母 Schwanniomyces occidentalis植物桿菌 Lactobacillus plantarum

人成纖維瘤細(xì)胞玉蜀黍蠕孢 Helminthosporium maydis

奈正青霉 Eupenicillium sinaicum人支氣管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

RM1(大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞)小鼠卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基

枝芽胞菌 Virgibacillus sp.桿菌屬 Lactobacillus sp.

費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium frediiIII型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)

USMC(大鼠血管平滑肌細(xì)胞)大鼠食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

人心房肌細(xì)胞培養(yǎng)基凝結(jié)芽孢桿菌 Bacillus coagulans

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti香菇 Lentinula edodes

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarumM14(人黑色素瘤細(xì)胞)

人慢性骨髓性白血病細(xì)胞無色桿菌屬 Leucobacter sp.

佛羅里達(dá)側(cè)耳 Pleurotus florida異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala

田菁根瘤菌 Azorhizobium canlinodans293FT(人胚腎細(xì)胞)