蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：前列腺酸性磷酸酶(PAP)重組蛋白大鼠

英文名稱：Recombinant Prostatic Acid Phosphatase (PAP)

PSAP; ACPP; ACP3; PAPf39; 5'-NT; Prostatic Specific Acid Phosphatase; Ecto-5'-Nucleotidase

型號(hào)：GOY-01D109

酶與激酶

代謝通路

腫瘤免疫

骨骼代謝

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：50.1kDa

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Val4~Ile418 (Accession # NM_001134901.1) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Kallikrein 7 (KLK7)  產(chǎn)品名稱：激7(KLK7)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Bruton'S Tyrosine Kinase (Btk)  產(chǎn)品名稱：布魯東氏激酶(Btk)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Protein Kinase C Alpha (PKCa)  產(chǎn)品名稱：蛋白激酶Cα(PKCa)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Protein Kinase C Alpha (PKCa)  產(chǎn)品名稱：蛋白激酶Cα(PKCa)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Beta (PDHb)  產(chǎn)品名稱：丙酮酸脫氫酶β(PDHb)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Beta (PDHb)  產(chǎn)品名稱：丙酮酸脫氫酶β(PDHb)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

蛇毒蛋白巴曲酶抗體 Batroxobin

β葡聚糖受體抗體 beta Glucan Receptor

非受體性蛋白激酶ETK抗體 BMX

磷酸化非受體性蛋白激酶ETK抗體 Phospho-BMX (Tyr40)

磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 phospho-BAD (Ser128)

BarX1蛋白抗體 BarX1

β1，3半乳糖轉(zhuǎn)移酶3抗體 B3GALNT1

紅細(xì)胞陰離子交換蛋白1抗體 Band3

Bcl-2同源結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 Beclin 1

骨形態(tài)發(fā)生蛋白4抗體 BMP4

腦特定蛋白Brn3B抗體 BRN3B

腦和急性白血病胞漿蛋白抗體 BAALC

前列腺酸性磷酸酶(PAP)重組蛋白大鼠小鼠神經(jīng)干細(xì)胞（EGFP標(biāo)記）

噬尼古丁節(jié)桿菌 Arthrobacter nicotinovorans

局限青霉 Penicillium resteictum

小鼠皮下脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基酸球菌霍氏亞種 Lactococcus lactis subsp. hordniae

多枝鐮孢束梗鏈格孢 Alternaria bokurai

人臍帶單核細(xì)胞培養(yǎng)基人膀胱移行細(xì)胞

爪哇根霉 Rhizopus javanicus大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

QBC-939, 人膽管細(xì)胞

木生條孢牛肝菌 Boletellus emodensis

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti黑曲霉 Aspergillus niger

植物桿菌 Lactobacillus plantarum蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

根瘤菌HA(人羊膜細(xì)胞)