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M2-型丙酮酸激酶(PKM2)重組蛋白大鼠

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產(chǎn)品型號(hào)

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-02 16:53:05瀏覽次數(shù):250次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D235 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Pyruvate kinase isozymes M2 (PKM2)
物種 Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
M2-型丙酮酸激酶(PKM2)重組蛋白大鼠公司正在出售的產(chǎn)品:人原β(FGB)ELISA試劑盒96T 0.312-20 ng/mL人線粒體鐵蛋白(FTMT)ELISA試劑盒96T 0.625-40 ng/mL人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)ELISA試劑盒96T 0.47-30 ng/mL

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

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英文名稱:Recombinant Salt Inducible Kinase 2 (SIK2)  產(chǎn)品名稱:鹽誘導(dǎo)激酶2(SIK2)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

M2-型丙酮酸激酶(PKM2)重組蛋白大鼠

Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

GOY-01D235

 

 

產(chǎn)品名稱:M2-型丙酮酸激酶(PKM2)重組蛋白大鼠

英文名稱:Recombinant Pyruvate kinase isozymes M2 (PKM2)

M2PK; PKM; M2-PK; PKM1; CTHBP; OIP3; PK3; PKM; TCB; THBP1; Pyruvate kinase muscle isozyme; Thyroid hormone-binding protein 1; Cytosolic thyroid hormone-binding protein; Pyruvate Kinase, Muscle

型號(hào):GOY-01D235

酶與激酶

腫瘤免疫

物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::Cytoplasm. Nucleus

預(yù)測分子量:26.4kDa

實(shí)際分子量:27kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Val324~Pro531 (Accession # P11980) with

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):9.0

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

1號(hào)染色體開放閱讀框177抗體 C1orf177

1號(hào)染色體開放閱讀框174抗體 C1orf174

1號(hào)染色體開放閱讀框180抗體 C1orf180

1號(hào)染色體開放閱讀框182抗體 C1orf182

1號(hào)染色體開放閱讀框183抗體 C1orf183

1號(hào)染色體開放閱讀框187抗體 C1orf187

1號(hào)染色體開放閱讀框189抗體 C1orf189

1號(hào)染色體開放閱讀框190抗體 C1ORF190

1號(hào)染色體開放閱讀框194抗體 C1orf194

1號(hào)染色體開放閱讀框198抗體 C1orf198

1號(hào)染色體開放閱讀框192抗體 C1orf192

1號(hào)染色體開放閱讀框21抗體 C1orf21

M2-型丙酮酸激酶(PKM2)重組蛋白大鼠土曲霉 Aspergillus terreus鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

HCT 116(人結(jié)腸細(xì)胞)BSC-1(猴腎細(xì)胞)

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis

屎腸球菌 Enterococcus faecium酒假絲酵母 Candida kefyr

德巴利酵母 Debaryomyces occidentalis地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

Psi2 DAP(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)THP-1人單核白血病細(xì)胞

赭曲霉 Aspergillus ochraceus直絲淡紫灰鏈霉菌 Streptomyces lavendularectus

大鼠肝細(xì)胞NIH/3T3, 小鼠成纖維細(xì)胞系

紫紅曲霉 Monascus purpureus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

Western Blot封閉液Ⅰ(BSA,pH7.5)/Blocking Buffer(BSA)異常漢遜酵母 Hansenula anomala

嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

 


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