蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻?hù)要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱(chēng)：Recombinant Adenylyl Cyclase Associated Protein 1 (CAP1)

CAP; CAP1-PEN

型號(hào)：GOY-01D444

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜

預(yù)測(cè)分子量：13.4kDa

實(shí)際分子量：14kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Ala38~Lys149 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：6.8

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱(chēng)：Recombinant Ubiquitin Specific Peptidase 2 (USP2)  產(chǎn)品名稱(chēng)：泛素特異性肽酶2(USP2)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱(chēng)：Recombinant Beta-1,3-Glucuronyltransferase 2 (b3GAT2)  產(chǎn)品名稱(chēng)：β-1,3-葡糖醛酸基移酶2(b3GAT2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱(chēng)：Recombinant Calpain 7 (CAPN7)  產(chǎn)品名稱(chēng)：鈣7(CAPN7)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱(chēng)：Recombinant Calpain 11 (CAPN11)  產(chǎn)品名稱(chēng)：鈣11(CAPN11)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱(chēng)：Recombinant Calpain 11 (CAPN11)  產(chǎn)品名稱(chēng)：鈣11(CAPN11)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱(chēng)：Recombinant Choline Kinase Beta (CHKb)  產(chǎn)品名稱(chēng)：激酶β(CHKb)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化真核翻譯起始因子4E抗體 phospho-eIF4E (Ser209)

EHM2蛋白抗體 EHM2

翻譯延伸因子EF-1a抗體 eEF1A1

磷酸化雌激素受體α抗體 Phospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537)

磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 phospho-EGFR (Tyr1068)

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體 phospho-Erk1 (Thr202 + Tyr204)

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體 phospho-ERK1 (Thr202/Tyr204) + ERK2 (Thr183/Tyr185)

蛋白激酶受體B4抗體 EPHB4

上皮鈉離子通道蛋白γ/γENaC抗體 epithelial Sodium Channel gamma

癌基因ETS2抗體 ETS2

蛋白激酶A5受體抗體 Ephrin A5

內(nèi)皮素3抗體 Endothelin 3

腺苷酸環(huán)化酶關(guān)聯(lián)蛋白1(CAP1)重組蛋白人STO(小鼠胚成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人皮膚肥大細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

HuH-6(人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人胰腺星狀細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

A9(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

腸道菌增菌肉湯(E E) 規(guī)格： 250g 用途： 用于腸道菌的增菌培養(yǎng)

腸型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP2)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Fatty Acid Binding Protein 2, Intestinal (FABP2)

月桂基鹽胰蛋白胨肉湯/LST肉湯/LST Broth各種食品中大腸菌群最近似值(MPN)測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

T-細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)因子1(TCIRG1)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant T-Cell, Immune Regulator 1 (TCIRG1)

大鼠肝細(xì)胞英文名稱(chēng)：CBRH-7919

纖溶抑制因子(TAFI)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor (TAFI)