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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH1)重組蛋白人

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-08 12:57:52瀏覽次數(shù):251次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D611 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant N-Acylsphingosine Amidohydrolase 1 (AS
物種 Homo sapiens (Human,人)
N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH1)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:人ADP/ATP移位酶1(ADP/ATP translocase 1)ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL人抑制劑B13(Serpin B13)ELISA試劑盒96T 1.56-100 ng/ml人同線蛋白1(ST1)ELISA試劑盒96T 0.312-20 ng/mL

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:基質(zhì)金屬15(MMP15)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 15 (MMP15)

產(chǎn)品名稱:基質(zhì)金屬15(MMP15)重組蛋白  物種:Sus scrofa; Porcine (Pig,豬)  英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 15 (MMP15)

產(chǎn)品名稱:多功能肽酶2(PSMB9)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Proteasome subunit beta type-9 (PSMB9)

產(chǎn)品名稱:蛋白激酶Bγ(PKBg)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Protein Kinase B Gamma (PKBg)

產(chǎn)品名稱:脂蛋白脂酶(LPL)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Lipoprotein lipase (LPL)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH1)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D611

 

 

英文名稱:Recombinant N-Acylsphingosine Amidohydrolase 1 (ASAH1)

AC; ASAH; PHP; PHP32; Acid Ceramidase; Acylsphingosine deacylase; Putative 32 kDa heart protein

型號(hào):GOY-01D611

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::溶酶體

預(yù)測(cè)分子量:32.7kDa

實(shí)際分子量:33kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Thr144~Trp395 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl, pH8.0, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):7.5

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

組蛋白去乙?;?/span>9抗體 HDAC9

短鏈L-3羥烷基脫氫酶抗體 SCHAD

組蛋白去乙?;?/span>10抗體 HDAC10

HOXB4抗體 HOXB4

磷酸化HER2受體抗體 Phospho-HER2(Tyr1248)

組蛋白去乙?;?/span>6抗體 HDAC6

磷酸化組蛋白去乙酰化酶6抗體 phospho-HDAC6 (Ser22)

組蛋白去乙?;?/span>7抗體 HDAC7

組蛋白去乙?;?/span>8抗體 HDAC8

磷酸化HER4抗體 Phospho-HER4 (Tyr984)

磷酸化組蛋白去乙?;?/span>7抗體 phospho-HDAC7 (Ser358)

tRNA連接酶抗體 HARS

N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶1(ASAH1)重組蛋白人QG-56(人肺扁平上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

麥芽汁培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 用途: 用于酵母菌的增菌培養(yǎng)

NCI-H838(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠腸微血管細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

B16-F10(小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

大鼠輸尿管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

ⅩⅢA1肽(F13A1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Coagulation Factor XIII A1 Polypeptide (F13A1)

抗生素Ⅴ號(hào)培養(yǎng)基/抗生素5號(hào)培養(yǎng)基/Antibiotic Agar NO.5抗生素微生物的效價(jià)測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

甲狀旁腺素受體2(PTHR2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Parathyroid Hormone Receptor 2 (PTHR2)

葡萄球菌增菌肉湯/Staphylococcus Enrichment Broth凝固酶陽生葡萄球菌選擇性增菌250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

肝細(xì)胞相關(guān)蛋白1(HCRP1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Hepatocellular Carcinoma Related Protein 1 (HCRP1)

 


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