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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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透明質(zhì)酸合酶1(HAS1)重組蛋白人

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-08 13:34:30瀏覽次數(shù):229次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D644 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Hyaluronan Synthase 1 (HAS1)
物種 Homo sapiens (Human,人)
透明質(zhì)酸合酶1(HAS1)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:人蛋白S100-A4(Protein S100-A4)ELISA試劑盒96T 15.6-1000 pg/mL人 Sestrin 2蛋白(SESN2)ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL人酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(Sphingomyelin phosphodiesterase)ELISA試劑盒96T 0.78-50 ng/mL

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

透明質(zhì)酸合酶1(HAS1)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D644

 

 

英文名稱:Recombinant Hyaluronan Synthase 1 (HAS1)

HuHAS1; HA synthase 1; Hyaluronate synthase 1; Hyaluronic acid synthase 1

型號(hào):GOY-01D644

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜

預(yù)測(cè)分子量:34.4kDa

實(shí)際分子量:33kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽:Tyr160~Ala416 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):7.7

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白  物種:Chicken (Gallus,雞)  英文名稱:Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)

產(chǎn)品名稱:碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)

產(chǎn)品名稱:拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Topoisomerase II (TOP2)

產(chǎn)品名稱:堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase)

產(chǎn)品名稱:堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase)

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

磷酸化熱休克因子1抗體 phospho-HSF1(Ser303)

磷酸化熱休克蛋白70抗體 phospho-HSP70(Tyr41)

磷酸化熱休克因子1抗體 phospho-HSF1(Ser307)

磷酸化熱休克蛋白70抗體 phospho-HSP70 (Tyr525)

E3泛素蛋白連接酶HACE1抗體 HACE1

結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體 Hamartin

肝細(xì)胞核因子4α抗體 HNF4A

磷酸化肝細(xì)胞核因子4α抗體 phospho-HNF4 (Ser313)

HRAS樣抑制因子2抗體 HRASLS2

熱休克蛋白家族40抗體 HSP40 homolog

淋巴特異性解旋酶抗體 HELLS

糖蛋白P43抗體 RBMX

透明質(zhì)酸合酶1(HAS1)重組蛋白人人結(jié)直腸腺細(xì)胞英文名稱:Caco-2

大腸菌群顯色培養(yǎng)基 規(guī)格: 10000ml 用途: 大腸菌群顯色培養(yǎng)基用于大腸菌群的快速檢測(cè)和計(jì)數(shù)

NCTC 1469(小鼠正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

TE-13(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

大鼠腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

內(nèi)脂素(VF)重組蛋白英文名稱:Recombinant Visfatin (VF)

酪蛋白胨/酪胨/胰酪胨/胰酪蛋白胨/CasitoneBR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

11(KLK11)重組蛋白英文名稱:Recombinant Kallikrein 11 (KLK11)

-泥氏染色液/Ziehl-Neelsen Strain細(xì)菌耐酸染色液10毫升×3支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

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