蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Legumain (LGMN)

AEP; LGMN1; PRSC1; Protease,Cysteine 1; Asparaginyl endopeptidase

型號：GOY-01D646

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：溶酶體

預(yù)測分子量：51.4kDa

實(shí)際分子量：51kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Val18~Tyr433 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl, pH8.0, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：6.0

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Nitric Oxide Synthase 2, Inducible (NOS2)

產(chǎn)品名稱：誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Nitric Oxide Synthase 2, Inducible (NOS2)

產(chǎn)品名稱：誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Nitric Oxide Synthase 2, Inducible (NOS2)

產(chǎn)品名稱：誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)重組蛋白  物種：Oryctolagus cuniculus (Rabbit，兔)  英文名稱：Recombinant Nitric Oxide Synthase 2, Inducible (NOS2)

產(chǎn)品名稱：糖原磷酸化酶M(PYGM)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Glycogen Phosphorylase, Muscle (PYGM)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

同源盒蛋白HoxB3抗體 Hoxb3

流感病毒H3N1血凝素抗體 H3N1 hemagglutinin

遺傳性血色病蛋白相關(guān)蛋白1抗體 HFE

甘油吸收/轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白GUP1抗體 HHATL

HHIP蛋白抗體 HHIP

亞鐵氧化酶抗體 Hephaestin

鳥苷酸釋放因子p532蛋白抗體 HERC1

HERC2 E3泛素蛋白連接酶抗體 HERC2

HERC4 E3泛素蛋白連接酶抗體 HERC4

HERC6 E3泛素蛋白連接酶抗體 HERC6

HERC3 E3泛素蛋白連接酶抗體 HERC3

MMF誘導(dǎo)片段蛋白1抗體 HERPUD1

天冬酰胺內(nèi)肽酶(LGMN)重組蛋白人發(fā)酵培養(yǎng)基 規(guī)格： 250g 用途： 用于鑒別發(fā)酵試驗(yàn)(化妝品衛(wèi)生規(guī)范微生物檢驗(yàn)方法2007版)。

明膠發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口

轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)重組蛋白英文名稱：Recombinant Transthyretin (TTR)

小鼠腎小管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

EB-3(人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

大鼠真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

人腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

人前列腺細(xì)胞英文名稱：DU 145

激活受體4(PAR4)重組蛋白英文名稱：Recombinant Protease Activated Receptor 4 (PAR4)

牛膽鹽/Bile salt from oxBR，60%25克國產(chǎn)/進(jìn)口

骨保護(hù)素(OPG)重組蛋白英文名稱：Recombinant Osteoprotegerin (OPG)