蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Calpain 3 (CAPN3)

CANPL3; p94; LGMD2; LGMD2A; nCL1; Calcium-activated neutral proteinase 3; Muscle-specific calcium-activated neutral protease 3; New calpain 1

型號(hào)：GOY-01D675

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：29.1kDa

實(shí)際分子量：32kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Ile602~Ala821 with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Acid Sphingomyelinase (ASM)

產(chǎn)品名稱：乳酸脫氫酶A(LDHA)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Lactate Dehydrogenase A (LDHA)

產(chǎn)品名稱：乳酸脫氫酶A(LDHA)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Lactate Dehydrogenase A (LDHA)

產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)醛縮酶(TALDO1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Transaldolase (TALDO1)

產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)醛縮酶(TALDO1)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Transaldolase (TALDO1)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

抑制素βB/Inhibin β B抗體 Inhibin beta B

白介素16抗體 IL-16

白介素11抗體 IL-11

白介素22受體抗體 IL-22R

白介素26抗體 IL-26/AK155

白介素-17D抗體 IL-17D/IL-27

環(huán)指蛋白217抗體 IBRDC1

白介素2抗體(人) IL-2

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3抗體 IGFBP3

白細(xì)胞介素6受體β抗體IL-6Rβ IL-6R Beta/CD130/gp130

白介素-23受體抗體 IL-23R

干擾素-gamma受體1抗體 IFNGR1

鈣蛋白酶3(CAPN3)重組蛋白人葡萄糖酪胨/Dextrose Casein Peptone Agar食品中蠟樣芽孢桿菌鑒定和計(jì)數(shù)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1(MRC1)

無(wú)菌豬血清/Sterile Defidrinated Pig BloodBR100/400毫升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

補(bǔ)體受體2(CR2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Complement Receptor 2 (CR2)

豬膽粉/豬膽汁粉/豬膽抽提液/Bile powder of pigBR100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

粘蛋白20(MUC20)重組蛋白英文名稱：Recombinant Mucin 20 (MUC20)

293FT(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

大鼠腎上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

SiHa(人子宮頸鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

胎兒表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

HK-2(人腎小管上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2