蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Glutathione Synthetase (GSS)

Glutathione synthase

型號(hào)：GOY-01D732

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：24.3kDa

實(shí)際分子量：27/24kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Asp268~Val474 (Accession # P48637) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：雙特異性磷酸酶1(DUSP1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Dual Specificity Phosphatase 1 (DUSP1)

產(chǎn)品名稱：雙特異性磷酸酶1(DUSP1)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Dual Specificity Phosphatase 1 (DUSP1)

產(chǎn)品名稱：碘甲腺原脫碘酶Ⅱ(DIO2)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Deiodinase, Iodothyronine, Type II (DIO2)

產(chǎn)品名稱：鈣3(CAPN3)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Calpain 3 (CAPN3)

產(chǎn)品名稱：組織B(CTSB)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Cathepsin B (CTSB)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

鉀通道多聚體結(jié)構(gòu)域KCTD18抗體 KCTD18

鉀離子通道蛋白G蛋白4抗體 KCNG4

胞質(zhì)接頭蛋白Keap1 KEAP1

舞蹈癥相關(guān)蛋白KALRN抗體 KALRN

細(xì)胞內(nèi)流鉀通道蛋白Kir4.1抗體 Kir4.1

腎病樣蛋白3抗體 KIRREL3

KLF樣轉(zhuǎn)錄因子7抗體 KLF7

Kelch樣蛋白8抗體 KLHL8

鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 KCTD7

鉀通道蛋白1抗體 Kv1.1

鉀離子通道蛋白家族KCNQ2抗體 KCNQ2

電壓門控鉀通道蛋白1抗體 KCNAB1

谷光甘肽合成酶(GSS)重組蛋白人高鹽/鹽/鈉/Mannitol Salt Aga的選擇性分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)重組蛋白英文名稱：Recombinant Glypican 4 (GPC4)

鈉蔗糖/Sodium Chloride Sucrose Agar副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

肌細(xì)胞生成素(MYOG)重組蛋白英文名稱：Recombinant Myogenin (MYOG)

OF發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

HO-8910PM(人高轉(zhuǎn)移卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人高轉(zhuǎn)移肺細(xì)胞英文名稱：95-D

膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL

MPC-11(小鼠漿細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2

I型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL

小鼠畸胎瘤細(xì)胞英文名稱：Pcc4