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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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彈性蛋白酶3A(ELA3A)重組蛋白人

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-08 16:00:52瀏覽次數(shù):180次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D764 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Elastase 3A (ELA3A)
物種 Homo sapiens (Human,人)
彈性蛋白酶3A(ELA3A)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:ADCK4蛋白抗體 英文名稱:ADCK4 0.2ml抑癌蛋白AIMP3抗體 英文名稱:AIMP3 0.2ml蛋白激酶A錨定蛋白6抗體 英文名稱:AKAP6 0.2ml

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:羰基還原酶3(CBR3)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Carbonyl Reductase 3 (CBR3)

產(chǎn)品名稱:羧肽酶A1(CPA1)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant Carboxypeptidase A1, Pancreatic (CPA1)

產(chǎn)品名稱:羧肽酶A2(CPA2)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant Carboxypeptidase A2, Pancreatic (CPA2)

產(chǎn)品名稱:羧肽酶A4(CPA4)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Carboxypeptidase A4 (CPA4)

產(chǎn)品名稱:羧肽酶B1(CPB1)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant Carboxypeptidase B1, Tissue (CPB1)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

彈性蛋白酶3A(ELA3A)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D764

 

 

英文名稱:Recombinant Elastase 3A (ELA3A)

CELA3A; ELA3; Chymotrypsin-Like Elastase Family Member 3A; Protease E

型號:GOY-01D764

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::分泌

預(yù)測分子量:57.9kDa

實(shí)際分子量:58kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Ser16~His270 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):6.2

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

瘦素抗體 Leptin

可溶性半乳糖凝集素3結(jié)合蛋白抗體 LGALS3BP

磷脂酸磷酸酯酶LPIN1抗體 Lipin 1

G蛋白偶聯(lián)受體6抗體 LGR6

λ輕鏈抗體 Lambda Light Chain

溶酶體相關(guān)膜蛋白2抗體 LAMP2

肺腺瘤易感蛋白2抗體 LAS2

磷酸化RNA聚合酶相關(guān)蛋白LEO1抗體 phospho-LEO1(Ser551)

磷酸化白細(xì)胞F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體 phospho-LSP1 (Ser204)

磷酸化腫瘤抑制基因LATS2抗體 phospho-LATS2 (Ser83)

腫瘤抑制基因LATS2抗體 LATS2

磷酸化白細(xì)胞F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體 phospho-LSP1 (Ser252)

彈性蛋白酶3A(ELA3A)重組蛋白人Vincristine sulfate 長春新堿2068-78-220mg

Delphinidin-3-O-Galactoside 飛燕草素-3-O-半乳糖苷68852-84-61mg

檸檬酸鈉緩沖液0.01mol-L, pH6.02L袋

Naringin 柚皮苷10236-47-220mg

飽和油紅O染色液500ml瓶

免疫組化筆1支支

切片盒50片包

彩虹245plus廣譜蛋白Marker(5-245KD)250ul支

Citicoline sodium 胞磷鈉1g瓶

Angelic anhudride 當(dāng)歸酸酐94487-74-820mg

Bavachinin 補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲19879-30-220mg

L-Glutamine L-25g瓶

Urea 尿素57-13-650mg

 


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