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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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脂肪酸去飽和酶2(FADS2)重組蛋白人

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-08 16:46:16瀏覽次數(shù):150次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D805 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Fatty Acid Desaturase 2 (FADS2)
物種 Homo sapiens (Human,人)
脂肪酸去飽和酶2(FADS2)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:磷酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體 英文名稱:phospho-ATM (Ser794) 0.1mlATP5E蛋白抗體 英文名稱:ATP5E 0.2mlATP6V0D2蛋白抗體 英文名稱:ATP6V0D2 0.2ml

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

脂肪酸去飽和酶2(FADS2)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D805

 

 

產(chǎn)品名稱:脂肪酸去飽和酶2(FADS2)重組蛋白人

英文名稱:Recombinant Fatty Acid Desaturase 2 (FADS2)

LLCDL2; FADSD6; D6D; TU13; DES6; Delta-6-Desaturase; Delta(6) fatty acid desaturase

型號(hào):GOY-01D805

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::分泌

預(yù)測(cè)分子量:18.5kDa

實(shí)際分子量:19kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽:Met1~His130 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):6.3

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Catechol-O-Methyltransferase (COMT)

產(chǎn)品名稱:兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant Catechol-O-Methyltransferase (COMT)

產(chǎn)品名稱:幾丁質(zhì)酶1(CHIT1)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Chitinase 1 (CHIT1)

產(chǎn)品名稱:糖磺基轉(zhuǎn)移酶9(CHST9)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Carbohydrate Sulfotransferase 9 (CHST9)

產(chǎn)品名稱:胱硫醚β合酶(CbS)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Cystathionine Beta Synthase (CbS)

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體 phospho-MEK2(Thr394)

苯甲酸肽水解酶抗體 MEP1A

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶3抗體 phospho-MEK3(Thr222)

絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體 MEK5

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體 phospho-MEK5(Ser142)

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體 phospho-MEK5(Ser311+Thr315)

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體 phospho-MEK5(Ser129)

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體 phospho-MEK5(Ser137)

致癌基因抗體 MTLC

絲裂原活化蛋白激酶MAP4K5抗體 MAP4K5

細(xì)胞遷移誘導(dǎo)因子5抗體 MIG5

MKLN1抗體 MKLN1

脂肪酸去飽和酶2(FADS2)重組蛋白人羊抗人IgG-RBITC0.5ml支

Choline chloride 化100g瓶

鈣熒光探針Fluo-3, AM1 mg支

Hypericin 金絲桃素548-04-910mg

pH值標(biāo)準(zhǔn)液(PH10.01)500ml瓶

核蛋白抽提試劑盒100T盒

Senegenin 遠(yuǎn)志皂苷元2469-34-320mg

1.5ml 樣品瓶,藍(lán)蓋,開(kāi)孔,帶刻度100支盒

Acifluorfene 三氟羧草50g瓶

X-α-gal (X-a-gal)5-溴-4--3-吲哚-a-D-半乳糖苷100mg瓶

糖原PAS染色液(過(guò)碘酸-雪夫染色液)50ml×2瓶

Sundan BlackB 蘇丹5g瓶

無(wú)菌去離子水 For Cell Culture100ml瓶

 


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