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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅲ(DIO3)重組蛋白大鼠

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-10 09:16:22瀏覽次數(shù):237次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D844 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Deiodinase, Iodothyronine, Type III (D
物種 Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅲ(DIO3)重組蛋白大鼠公司正在出售的產(chǎn)品:腺苷酸激酶2抗體 英文名稱:Adenylate kinase 2 0.2ml頂體前體蛋白抗體 英文名稱:Acrosin 0.2ml未知糖基化轉(zhuǎn)移酶AER61抗體 英文名稱:AER61 0.2ml

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅲ(DIO3)重組蛋白大鼠

Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

GOY-01D844

 

 

英文名稱:Recombinant Deiodinase, Iodothyronine, Type III (DIO3)

ITDI3; TXDI3; Type-III 5'-deiodinase

型號(hào):GOY-01D844

酶與激酶

物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜

預(yù)測(cè)分子量:45.1kDa

實(shí)際分子量:45kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽:Arg37~Thr169 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):6.3

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant Beta Secretase 2 (BACE2)

產(chǎn)品名稱:組織A(CTSA)重組蛋白  物種:Canis familiaris; Canine (Dog,犬)  英文名稱:Recombinant Cathepsin A (CTSA)

產(chǎn)品名稱:組織A(CTSA)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Cathepsin A (CTSA)

產(chǎn)品名稱:組織A(CTSA)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Cathepsin A (CTSA)

產(chǎn)品名稱:激6(KLK6)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Kallikrein 6 (KLK6)

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

神經(jīng)纖毛蛋白1抗體 Neuropilin 1

核因子2相關(guān)因子2抗體 Nrf2

神經(jīng)生長(zhǎng)因子4/5抗體 Neurotrophin 4

巢蛋白NID2抗體 Nidogen 2

線粒體鈉/氫交換蛋白質(zhì)2抗體 NHEDC2

神經(jīng)元素1抗體 Neurogenin 1

神經(jīng)肽Y抗體 Neuropeptide Y

神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體 Neurturin

神經(jīng)纖毛蛋白2抗體 Neuropilin 2

受體2D抗體 NR2D

受體2B抗體 NMDAR2B

原癌基因N-Ras抗體 NRAS

碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅲ(DIO3)重組蛋白大鼠HE染色試劑盒3×10ml盒

DCIP 2,6-二酚靛酚鈉1g瓶

Dexamethasone sodium phosphate 磷酸鈉5g瓶

p-Coumaric acid 對(duì)豆酸501-98-420mg

Laccase 漆酶1g瓶

Kanamycin ( 100mg/ml)卡那10ml瓶

CollagenaseⅡ 膠原酶Ⅱ100mg支

Ferric Cltrate 檸檬酸鐵100g瓶

Pterostilbene 紫檀芪537-42-820mg

普魯士藍(lán)染色試劑盒(Perls stain,中性紅法)2×50ml瓶

Tris飽和酚250ml瓶

載玻片雙面磨砂50片盒

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