蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Exostoses 1 (EXT1)

EXT; Ttv; LGCR, LGS; Langer-Giedion Syndrome Chromosome Region; Glucuronosyl-N-acetylglucosaminyl-Proteoglycan 4-Alpha-N-Acetylglucosaminyltransferase

型號：GOY-01D852

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測分子量：25.9kDa

實際分子量：27kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Cys334~Arg549 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：9.3

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：尿黑酸1,2-雙加氧酶(HGD)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Homogentisate-1,2-Dioxygenase (HGD)

產(chǎn)品名稱：N-?；掖减；?NAAA)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant N-Acylethanolamine Acid Amidase (NAAA)

產(chǎn)品名稱：組蛋白脫乙酰基酶6(HDAC6)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Histone Deacetylase 6 (HDAC6)

產(chǎn)品名稱：外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶1(ENPP1)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Ectonucleotide Pyrophosphatase/Phosphodiesterase 1 (ENPP1)

產(chǎn)品名稱：賴氨酰氧化酶樣蛋白1(LOXL1)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Lysyl Oxidase Like Protein 1 (LOXL1)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

生殖細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白NANOS2抗體 NANOS2

還原型輔酶Ⅱ氧化酶5/腺嘌呤二核苷酸磷酸抗體 NOX5

細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體 NFKB p52

磷酸化細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體 Phospho-NFKB2(Ser866+Ser870)

N-乙?；D(zhuǎn)移酶2抗體 NAT2

富含重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 NALP2

孤兒核受體TAK1抗體 NR2C2

骨巢蛋白抗體 Nanos3

磷酸化p-IκB-α抗體 phospho-NFKBIA(Ser32/36)

G21蛋白質(zhì)抗體 G21 protein

軸突生長誘向因子5抗體 Netrin 5

醌氧化還原酶抗體 NQO1

外生骨疣蛋白1(EXT1)重組蛋白人Voglibose 83480-29-920mg

NutrientAgar 營養(yǎng)(NA)250g瓶

RQ1 Rnase-Free DNase1000u支

Wogonin 漢黃芩素632-85-920mg

D-Sorbitol D-500g瓶

Muscone 麝香酮541-91-30.15mL

Neomyein Sulfate 新10g瓶

羊抗人IgA（免疫血清）0.5ml支

超濾離心管 4ml-3KD4ml個

4×SDS-PAGE分離膠緩沖液(PH=8.8)500ml瓶

Choline bitartrate 酒石酸氫100g瓶

HEPES N-2--N’-2-乙基磺酸100g瓶