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產(chǎn)品型號(hào)
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-10 10:59:49瀏覽次數(shù):300次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D967 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Acyloxyacyl Hydrolase (AOAH) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
?;人崴饷?/span>(AOAH)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D967 |
英文名稱:Recombinant Acyloxyacyl Hydrolase (AOAH)
酶與激酶
型號(hào):GOY-01D967
物種:Homo sapiens (Human,人)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::分泌
預(yù)測(cè)分子量:34.7kDa
實(shí)際分子量:35kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)
片段與標(biāo)簽:Ser24~Gln300 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):6.7
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:蛋白激酶Cα(PKCa)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Protein Kinase C Alpha (PKCa)
產(chǎn)品名稱:乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Choline Acetyltransferase (ChAT)
產(chǎn)品名稱:乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Choline Acetyltransferase (ChAT)
產(chǎn)品名稱:組織S(CTSS)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 英文名稱:Recombinant Cathepsin S (CTSS)
產(chǎn)品名稱:?jiǎn)伟毖趸?/span>A(MAOA)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 英文名稱:Recombinant Monoamine Oxidase A (MAOA)
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1/AMPK α 1抗體 AMPK alpha-1
一種腫瘤抑制基因抗體(N端) PTEN
維生素K依賴的蛋白C重鏈抗體 protein C
神經(jīng)叢蛋白A1抗體 Plexin A1
p21激活激酶4抗體 PAK4
磷酸化p21激活激酶4/5/6抗體 Phospho-PAK4(Ser474) + PAK5(Ser602) + PAK6(Ser560)
磷酸化p21激活激酶1/2抗體 Phospho-PAK1(Ser199 + Ser204) + PAK2 (Ser192 + Ser197)
磷酸化p21激活激酶1/2抗體 Phospho-PAK1 + PAK2 + PAK3 (T423 + T402 + T421)
磷酯酶Cγ2抗體 PLCG 2
磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-α抗體 Phospho-PDGFRA(Tyr1018)
磷酸化p21激活激酶2抗體 Phospho-PAK2 (Ser20)
磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-α抗體 Phospho-PDGFRA(Tyr754)
?;人崴饷?/span>(AOAH)重組蛋白人Bavachin 補(bǔ)骨脂二氫黃酮-補(bǔ)骨脂甲素19879-32-420mg
L-Valine L- 纈10g瓶
Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ100g瓶
Kojic acid 曲酸25g瓶
DMSO 二甲亞砜(細(xì)胞培養(yǎng)級(jí))50ml瓶
Dextran T-10 葡聚糖 T-1010g瓶
Rhaponiticin 土大黃苷155-58-820mg
Inositol 肌醇87-89-820mg
革蘭氏陽(yáng)性菌質(zhì)粒小量提取試劑盒50T盒
麥迪康 口罩 50只/盒粉色盒
TMB單組份顯色液100ml瓶
Loganic acid 馬錢苷酸22255-40-920mg
Nuclear fast red 核固紅5g瓶
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