蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Creatine Kinase B (CK-BB)

CKB; CKBB; CK-B; CK-1; Creatine Kinase, Brain

型號：GOY-01D1040

酶與激酶

代謝通路

心腦血管

神經(jīng)科學(xué)

物種：Canis familiaris; Canine (Dog，犬)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：41.3kDa

實(shí)際分子量：46kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Lys11~Leu367 (Accession # P05124) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：AMP激活蛋白激酶β2(PRKAb2)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Protein Kinase, AMP Activated Beta 2 (PRKAb2)

產(chǎn)品名稱：WNK賴缺乏蛋白激酶1(WNK1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant WNK Lysine Deficient Protein Kinase 1 (WNK1)

產(chǎn)品名稱：血漿過氧化物酶(GPX3)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Glutathione Peroxidase 3, Plasma (GPX3)

產(chǎn)品名稱：丙酮酸脫氫酶復(fù)合體成分X(PDHX)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Complex Component X (PDHX)

產(chǎn)品名稱：TTK蛋白激酶(TTK)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant TTK Protein Kinase (TTK)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

ras癌基因家族Rab11蛋白抗體 Rab11

ras癌基因家族Rab5蛋白抗體 RAB5

結(jié)合蛋白4抗體 RBP4

胰島細(xì)胞再生因子ICRF抗體 REG1A

腎素/血管緊張素形成酶Ren1抗體 Renin

分泌性蛋白RSPO1抗體 RSPO1

RAS的GTP酶激活蛋白抗體 RASA2

G蛋白P21 RAC2抗體 RAC2

ras癌基因家族Rab8蛋白/原癌基因c MEL抗體 RAB8

ras癌基因家族Rab2抗體 RAB2

GTP結(jié)合蛋白RAC1+RAC2抗體 RAC1+RAC2

ras癌基因家族Rab3a抗體 RAB3A

肌酸激酶B(CK-BB)重組蛋白犬Aflatoxin G1 黃曲G11165-39-520mg

L-Cysteine L-半25g瓶

Taurocholic acid Sodium Salt 牛磺鈉145-42-620mg

Triquick Reagent 總RNA提取試劑500ml瓶

1000ul吸頭盒60孔個(gè)

Thidiazuron (TDZ) 噻苯隆100mg瓶

Prim-O-glucosylcimifugin 升麻素苷80681-45-420mg

0.1%呂氏堿性美藍(lán)染色液500ml瓶

Cantharidin 斑蝥素56-25-720mg

0.2mlPCR管(平蓋)1000支包

AP標(biāo)記抗體稀釋液100ml瓶

Kinetin 6-糠氨基嘌呤（激動(dòng)素）1g瓶

胰-EDTA消化液(0.25%) 不含酚紅100ml瓶