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周期素依賴性激酶4(CDK4)重組蛋白小鼠

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2023-03-13 11:39:09瀏覽次數(shù):245次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D1262 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Recombinant Cyclin Dependent Kinase 4 (CDK4)
物種 Mus musculus (Mouse,小鼠)
周期素依賴性激酶4(CDK4)重組蛋白小鼠公司正在出售的產(chǎn)品:磷酸化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體 英文名稱:phospho-B MyB (Thr487) 0.1ml磷酸化B-Raf抗體 英文名稱:phospho-B-Raf (Ser729) 0.1ml磷酸化B-Raf抗體 英文名稱:phospho-B Raf (Thr598) 0.1ml

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:鉬輔因子合成蛋白2(MOCS2)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Molybdenum Cofactor Synthesis 2 (MOCS2)

產(chǎn)品名稱:糖合酶1(CHSY1)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Carbohydrate Synthase 1 (CHSY1)

產(chǎn)品名稱:肌醇六磷酸激酶2(IHPK2)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Inositol Hexaphosphate Kinase 2 (IHPK2)

產(chǎn)品名稱:脫氧核糖核酸酶Ⅱβ(DNASEIIb)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant Deoxyribonuclease II Beta (DNASEIIb)

產(chǎn)品名稱:三肽基肽酶Ⅱ(TPP2)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Tripeptidyl Peptidase II (TPP2)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

周期素依賴性激酶4(CDK4)重組蛋白小鼠

Mus musculus (Mouse,小鼠)

GOY-01D1266

 

 

英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 4 (CDK4)

CMM3; PSK-J3; Cell division protein kinase 4

型號:GOY-01D1266

酶與激酶

腫瘤免疫

物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::Cytoplasm. Nucleus. Membrane.

預(yù)測分子量:33.8kDa

實際分子量:31kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Tyr6~Leu295 (Accession # P30285) with

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點:6.5

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

磷酸化結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體 phospho-TSC1(Thr417)

磷酸化端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶抗體 phospho-TERT(Ser1125)

磷酸化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體 Phospho-TSC2(Ser540)

磷酸化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體 Phospho-TSC2(Ser1420)

磷酸化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體 Phospho-TSC2(Ser1798)

磷酸化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體 Phospho-TSC2(Ser664)

磷酸化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體 Phospho-TSC2(Ser1418)

腫瘤壞死因子受體1抗體 TNFR1

跨膜蛋白166抗體 TMEM166

腫瘤蛋白p53誘導(dǎo)蛋白13(腫瘤抑制基因) TP53I13

跨膜蛋白超家族9-1抗體 TM9SF1

周期素依賴性激酶4(CDK4)重組蛋白小鼠Catechin hydrate 兒茶精水合物88191-48-420mg

堿性(1:200000)100G瓶

2,3-Dihydroxybenzoic acid 2,3-二羥基苯甲酸303-38-850mg

TetraMethylaMMoniuM hydroxide pentahydrate 四甲氫氧化銨 (25%水溶液)50g瓶

羊脾臟淋巴細(xì)胞分離液試劑盒200ml/KIT盒

S-8大孔吸附樹脂500g瓶

Typhaneoside 香蒲新苷104472-68-620mg

AMPNa2 5-單二鈉4578-31-820mg

Xylene Cyanol FF 二甲苯青FF1g瓶

透析袋 扁寬31 截留分子量3500-50000.5m/即用型管

羊抗人IgA1mg支

Acetylcholine chloride 化乙酰5g瓶

Rhodamine 羅丹明1235mg支

 


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