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肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)重組蛋白小鼠

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-13 12:15:42瀏覽次數(shù):262次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D1316 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Myosin Light Chain Kinase (MYLK)
物種 Mus musculus (Mouse,小鼠)
肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)重組蛋白小鼠公司正在出售的產(chǎn)品:磷酸化非受體性蛋白激酶ETK抗體 英文名稱:phospho-BMX (Tyr566) 0.1ml磷酸化促凋亡調(diào)節(jié)蛋白BNIP3抗體 英文名稱:phospho-BNIP3 (Ser95) 0.1ml核糖體合成蛋白BOP1抗體 英文名稱:BOP1 0.2ml

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)重組蛋白小鼠

Mus musculus (Mouse,小鼠)

GOY-01D1316

 

 

英文名稱:Recombinant Myosin Light Chain Kinase (MYLK)

KRP; MLCK108; MLCK210; MSTP083; MLCK; smMLCK; MYLK1; MLCK1; Telokin; Myosin Light Chain Kinase, Smooth Muscle, deglutamylated form; Kinase-related protein

型號(hào):GOY-01D1316

酶與激酶

心腦血管

物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::Cytoplasm. Cell projection, lamellipodium. Cleavage furrow. cytoskeleton.

預(yù)測(cè)分子量:26.8kDa

實(shí)際分子量:53kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Met1684~Asp1884 (Accession # Q6PDN3) with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):5.8

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:丙氨酰tRNA合成酶2(AARS2)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant Alanyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (AARS2)

產(chǎn)品名稱:酪氨酰tRNA合成酶2(YARS2)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Tyrosyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (YARS2)

產(chǎn)品名稱:脯氨酰tRNA合成酶2(PARS2)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Prolyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (PARS2)

產(chǎn)品名稱:甲硫氨酰tRNA合成酶2(MARS2)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Methionyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (MARS2)

產(chǎn)品名稱:1(PRSS1)重組蛋白  物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)  英文名稱:Recombinant Protease, Serine 1 (PRSS1)

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

腫瘤壞死因子受體超家族成員27抗體 EDA2R

酪蛋白轉(zhuǎn)移酶2抗體 TPST2

四分子交聯(lián)體14抗體(四旋蛋白) TSPAN14

甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1相關(guān)蛋白26抗體 TAP26/CCDC59

線粒體外膜受體Tom20抗體 TOM20

腫瘤壞死因子配體超家族成員12抗體 TWEAK

睪高表達(dá)蛋白4抗體 THEG4/C1orf223

ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)因子1抗體 Tap1

微管蛋白β3抗體 Tubb3/Tubulin beta 3

腫瘤壞死因子受體超家族成員13B抗體 TNFRSF13B

破傷風(fēng)毒素輕鏈抗體 Tetanus toxin light chain

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白44抗體 TXNDC4

肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)重組蛋白小鼠Homobrassinolide 28-高蕓苔素內(nèi)酯100mg瓶

Recombinant Human Insulin 20mg瓶

Colchicine 250mg支

Casein Peptone 酪蛋白胨250g瓶

Itraconazole 84625-61-6100mg

酵母質(zhì)粒小量提取試劑盒50T盒

細(xì)胞過濾篩(不銹鋼)60目個(gè)

Schiff試劑100ml瓶

Honokiol 和厚樸酚35354-74-620mg

ChloramphenicoL 5g瓶

Berberine 小檗堿2086-83-120mg

Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ25g瓶

5×考馬斯亮藍(lán)G-250(蛋白定量用)100ml瓶

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