蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Phosphoglycerate Mutase 1, Brain (PGAM1)

PGAMA; PGAM-B; BPG-dependent PGAM 1; Phosphoglycerate mutase isozyme B

型號：GOY-01D1486

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌

預(yù)測分子量：32.4kDa

實際分子量：32kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Ala2~Lys254 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：6.8

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

磷酸乙醇酸磷酸酶(PGP)重組蛋白英文名稱：Recombinant Phosphoglycolate Phosphatase (PGP)酶與激酶物種：Mouse，小鼠

胸苷酸合成酶(TYMS)活性蛋白英文名稱：Active Thymidylate Synthetase (TYMS)TS; TMS; TSase; Thymidylate Synthase物種：Human，人

丙酮酸脫氫酶β(PDHb)重組蛋白英文名稱：Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Beta (PDHb)PDH-B; PHE1B; PHE1-B; Pyruvate Dehydrogenase(lipoamide)Beta物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

過敏毒素C3受體/補體C3受體抗體 C3a Receptor/C3aR 0.2ml

雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體（N端） ADAR1 (N-terminus) 0.2ml

白細胞共同抗原抗體 CD45/B220 0.1ml

生長停滯特異性蛋白8抗體 GAS8 0.2ml

腫瘤蛋白p53誘導(dǎo)蛋白13(腫瘤抑制基因) TP53I13 0.2ml

應(yīng)激活化蛋白激酶3抗體（絲裂原活化蛋白激酶12） SAPK3/MAPK12 0.2ml

腦源性tau蛋白激酶抗體 TTBK1/BDTK 0.2ml

磷酸化抑癌蛋白EZH2抗體 phospho-KMT6/EZH2(Thr487) 0.1ml

橋尾蛋白抗體 Gephyrin 0.1ml

鋅指蛋白23抗體 ZNF23 0.2ml

粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤轉(zhuǎn)運蛋白1抗體 MALT1 0.2ml

甲狀腺激素受體相關(guān)蛋白3抗體 Thrap3/TRAP150 0.2ml

磷酸甘油酸變位酶1(PGAM1)重組蛋白人D-Aspartic acid D-天冬-D-天25g瓶

Benzyltrimethylammonium chloride 芐基三甲化銨500g瓶

Polyethylene-polypropylene glycol 407 泊洛沙姆407100g瓶

DNA含量(細胞周期)檢測試劑盒50T盒

10ml離心管(尖底羅口)100支包

兔IgG干粉10mg支

質(zhì)粒小量提取試劑盒50T盒

進口乳膠手套70只/盒（無菌獨立包裝）小號盒

Paraformaldehyde 多聚甲醛500g瓶

Scoparone 濱蒿內(nèi)酯120-08-120mg

Dodecyl β-D-malyranoside 十二烷基-β-D-麥芽糖苷250mg瓶

聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒50T盒