蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱(chēng)：Recombinant Sialyltransferase 1 (SIAT1)

CD75; ST6GAL1; ST6Gal I; ST6GalI; B-cell antigen CD75; Beta-galactoside alpha-2,6-sialyltransferase 1; ST6 Beta Galactosamide Alpha-2,6-Sialyltranferase 1

型號(hào)：GOY-01D2952

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜, 分泌

預(yù)測(cè)分子量：47.3kDa

實(shí)際分子量：47kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Lys27~Cys406 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：9.3

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

Recombinant Lipase A, Lysosomal Acid (LIPA)產(chǎn)品名稱(chēng)：溶酶體酸脂肪酶A(LIPA)重組蛋白物種：Mouse，小鼠LAL; CESD; Lipase A,Lysosomal Acid,Cholesterol Esterase(Wolman Disease); Acid Cholesteryl Ester Hydrolase; Lysosomal acid lipase/cholesteryl ester hydrolase

Recombinant Protein O-Fucosyltransferase 1 (POFUT1)產(chǎn)品名稱(chēng)：蛋白O-巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶1(POFUT1)重組蛋白物種：Human，人O-FUT; O-Fuc-T; FUT12; GDP-Fucose Protein O-Fucosyltransferase 1; Peptide-O-fucosyltransferase 1

Recombinant Carboxylesterase 1 (CES1)產(chǎn)品名稱(chēng)：羧酸酯酶1(CES1)重組蛋白物種：Human，人ACAT; CEH; CES2; HMSE1; PCE1; SES1; TGH; Retinyl ester hydrolase; Serine esterase 1; Triacylglycerol hydrolase; Egasyn; Cocaine carboxylesterase; Liver Carboxylesterase 1

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

YAC-1(小鼠淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

羅-d3 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Ronidazole-d3

 羊膽鹽/Bile salt from sheepBR25克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

維生素K1-d7 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Vitamin K1-d7

 NCI-H1688(人典型小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

二氫維生素K1 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Dihydrovitamin K1

 SF767(人腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

維生素K1 2,3-環(huán)氧化物 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Vitamin K1 2,3-Epoxide

 NC膜(0.22um)30cm × 3m，15cm x 20cm30cm × 3m，15cm x 20cmgersion

他丁 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Cilastatin

 A2(人腺樣囊性細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

丁鈉 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Cilastatin sodium

 LS 180(人結(jié)腸腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

- 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Oxcarbazepine Enol-sulfate

 HSC-T6(大鼠肝星形細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

-D4(主要的) 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Oxcarbazepine-D4 (Major)

唾液酸轉(zhuǎn)移酶1(SIAT1)重組蛋白人2 ug pWPXL pWPXL 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

人補(bǔ)體片斷4b(C4b)免疫試劑盒

皰肉培養(yǎng)基基礎(chǔ) Cooked Meat Medium Base 250g

10塊 LB平板培養(yǎng)基（LB-Amp平板） LB Petri Dish 低溫

250mL Gelatin Veronal Buffer with Mg++ and EGTA (GVBMG)   Gelatin Veronal Buffer with Mg++ and EGTA (GVBMG)   常溫保存

人FMS樣酪激3配體(Flt-3L)免疫試劑盒

50次 液體樣品RNAout Liquid Sample RNAOUT 4℃保存

2 ug pCDFDuet-1 pCDFDuet-1 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

人表皮生長(zhǎng)因子(EGF)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

50次 柱式BAC DNAout  Column BAC DNAOUT 常溫保存(RNase A溶液4℃保存)

50次 柱式植物RNA-DNA雙提試劑盒