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資源名稱:亞麻刺盤孢培養(yǎng)
種屬:Colletorichumlagenarium(Westerd.)Tochinai
安全等級 1
模式菌株 no
應用領域 亞麻炭疽病原菌。分離源:炭疽病亞麻。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基 14
生長條件 25-28℃
亞麻刺盤孢培養(yǎng)檢測方法:
1.將病人標本和/或液狀對照品放至室溫(15-30℃),輕輕混勻。測試前從包裝袋中取出檢測卡平放。
2.將1根Binax樣本拭子浸入要測試的標本中,*浸沒拭子頭。如果拭子有滴水,將拭子靠在收集容器的邊上,排去多余的液體。
3.檢測卡內部的右手邊有兩個孔,將拭子插入底部的孔中(拭子孔),穩(wěn)步向前推,使整個拭子頭在上部的孔中可見,不要取出拭子。
4.垂直持放A試劑瓶,高出檢測卡上方1/2到1英寸,慢慢向底部的孔中加入3滴A試劑。
5.立即從檢測卡的右緣揭去粘附襯,封閉檢測卡,過15分鐘在窗口判讀結果。15分鐘后讀取的結果可能不準確。然而,有些陽性病人不到15分鐘就出現(xiàn)可見樣品線。
亞麻刺盤孢培養(yǎng)注意事項:
1. 取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。
2. 凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO)對細胞不是*無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作 較大,因此,必須在1-2min內使凍存液*融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。
3. 離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。
4. 離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除 DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大, 死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液 體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無有異常。
5. 細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15m培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。
6. 復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。
7. 加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響 細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是 10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
石吊蘭甲素 規(guī)格: 進口/國產
Irisflorentin 次野鳶尾黃素 規(guī)格: 20mg/支 進口/國產
Sesamoside 胡麻屬苷 規(guī)格: 20mg/支 進口/國產
路路通酸 規(guī)格: 20mg/支 進口/國產
表木栓醇 規(guī)格: 20mg/支 進口/國產
鴨腳樹葉堿 規(guī)格: 20mg/支 進口/國產
山柰酚-3-O-蕓香糖苷 規(guī)格: 20mg/支 進口/國產
4'-Demethylepipodophyllotoxin 4'-去甲氧基表鬼臼毒素 規(guī)格: 20mg/支 進口/國產
葫蘆素B 規(guī)格: 20mg/支 進口/國產
Wogonin 漢黃芩素 規(guī)格: 20mg/支 進口/國產
Usnic acid 松蘿酸 規(guī)格: 20mg/支 進口/國產 松羅酸
規(guī)格: 20mg/支 進口/國產 傘形花內酯; 傘形酮
亞麻刺盤孢培養(yǎng) 直接蘭2B分子式:分子量:英文名稱:Directblue2BCAS號:
鹽多沙普侖分子式:414.97分子量:C24H31ClN2O2英文名稱:DoSchaapLeonhydrochlorideCAS號:7081-53-0
綠茶提取物分子式:分子量:英文名稱:GreenteaextractCAS號:
2,5-二氯-3-硝甲分子式:236.01分子量:C7H3Cl2NO4英文名稱:2,5-two-3-CAS號:88-86-8
4',6-二脒-2-吲哚二鹽鹽分子式:350.25分子量:C16H15N5·2HCl英文名稱:4',6-two-2-twophenylamidineindolehydrochlorideCAS號:28718-90-3
拉沙里菌素分子式:612.77分子量:C34H53NaO8英文名稱:LacharibacteriumCAS號:25999-20-6
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