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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>科研細胞>>細胞培養(yǎng)基>> 心室肌細胞*培養(yǎng)基
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所 在 地上海市
更新時間:2022-03-22 22:10:22瀏覽次數(shù):230次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100mL/125mL×4 |
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貨號 | YS-02X10050 | 應用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
產(chǎn)品名稱:心室肌細胞*培養(yǎng)基
規(guī)格:100mL/125mL×4
貨號:YS-02X10050
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
TIMP-2/FITC 熒光素標記金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Bak(BCL2 homologous antagonist/killer) Bcl-2同源拮抗劑Bak(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2mg
滑膜細胞凋亡抑制物1抗體 SYVN1 hu、 rat、 mo、 cattle 0.2ml
Phospho-Stathmin(Ser25) 英文名稱: 磷酸化原癌基因蛋白18 0.1ml
EPS8 英文名稱: 表皮生長因子受體底物8抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-LRP6(Thr1479) 磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體 規(guī)格 0.1ml
Bak(BCL2 homologous antagonist/killer) Bcl-2同源拮抗劑Bak(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2mg
Ret IgM ELISA Kit 大鼠球蛋白MMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
phospho-Ephrin B (Tyr324/329) 磷酸化Ephrin B抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MTTP 微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運蛋白 規(guī)格 0.2ml
SAP(Human Serum amyloid P) ELISA Kit 人血清淀粉樣蛋白P 96T
SPDEF 英文名稱: 上皮特異性ETs轉(zhuǎn)錄因子抗體 0.1ml
CARD6 英文名稱: 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 0.2ml
phospho-Ephrin B (Tyr324/329) 磷酸化Ephrin B抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Goat Bovine IgG/Cy5 Cy5標記的羊抗IgG 0.1ml
FGF3 英文名稱: 纖維母細胞生長因子3抗體 0.1ml
周期素依賴性激酶6抗體 CDK6 0.2ml
OCT2 /FITC 熒光素標記陽離子轉(zhuǎn)運蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh plant lectin B4/IB4 植物凝集素IB4 規(guī)格 0.2ml
Rabbit horse IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗馬IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
心室肌細胞*培養(yǎng)基(含HRP二抗)人黏著斑酶(FAK)ELISA試劑盒,
TEM電鏡凍切片組織化學HRP酶聯(lián)DAB*間接檢測試劑盒10次人α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒,
(含一抗和HRP二抗)人軸突生長誘向因子1(Ntn1)ELISA試劑盒,
TEM電鏡凍切片組織化學HRP酶聯(lián)DAB直接檢測試劑盒10次人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)ELISA試劑盒,
(含HRP一抗)人甲狀旁腺素樣蛋白(PLP)ELISA試劑盒,
TEM電鏡凍切片組織化學AP酶聯(lián)NBT/BCIP基礎(chǔ)檢測試劑盒50次小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)ELISA試劑盒,
(無一抗和二抗)大鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒,
TEM電鏡凍切片組織化學AP酶聯(lián)NBT/BCIP20次大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒,
間接檢測試劑盒(含AP二抗)植物25羥基D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒,
TEM電鏡凍切片組織化學AP酶聯(lián)NBT/BCIP*間接檢測試劑盒10次mCPC培養(yǎng)基添加劑每瓶添加于100ml mCPC培養(yǎng)基中
(含一抗和AP二抗)1,2,3-駢三氮唑
TEM電鏡凍切片組織化學AP酶聯(lián)NBT/BCIP直接檢測試劑盒10次L-甲狀腺素鈉
(含AP一抗)櫟櫻酸 Roburic acid
石蠟切片組織化學HRP酶聯(lián)DAB基礎(chǔ)檢測試劑盒(無一抗和二抗)50次一縮二
石蠟切片組織化學HRP酶聯(lián)DAB間接檢測試劑盒(含HRP二抗)20次4-羥基吡啶
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
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