蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床！

商品介紹：

相關產(chǎn)品：

血管非炎性蛋白3(VNN3)重組蛋白英文名稱：Recombinant Vanin 3 (VNN3)Homo sapiens (Human，人)

血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)活性蛋白英文名稱：Active Angiotensin I Converting Enzyme (ACE)Homo sapiens (Human，人)

血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)重組蛋白英文名稱：Recombinant Angiotensin I Converting Enzyme (ACE)Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)活性蛋白英文名稱：Active Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)Homo sapiens (Human，人)   

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

注意事項：

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作 
BPOZ產(chǎn)品名稱: 伸長因子結(jié)合蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Horse

CART產(chǎn)品名稱: 卡因和安調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Sheep

Paralemmin 1產(chǎn)品名稱: 細胞膜調(diào)控蛋白Paralemmin 1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep

KRG2/DDX11產(chǎn)品名稱: 角質(zhì)細胞生長因子調(diào)節(jié)蛋白2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat

DYRK1A產(chǎn)品名稱: 絲氨suan/蘇氨suan蛋白激meiMNB抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

phospho-CHEK1 (Ser286)產(chǎn)品名稱: 細胞周期檢測點激mei1抗體交叉反應: Human, Mouse, Chicken, Dog, Horse

BRD2產(chǎn)品名稱: BRD2蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat

LRRC25產(chǎn)品名稱: 富含亮氨suan重復蛋白25抗體交叉反應: Human

phospho-LKB1 (Ser334)產(chǎn)品名稱: 絲氨suan/蘇氨suan蛋白激mei抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat

CNTROB產(chǎn)品名稱: 乳易感基因2相互作用蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Rabbit   

肉毒堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶1C(CPT1C)重組蛋白人N-乙酰轉(zhuǎn)移mei14(NAT14)ELISA試劑盒NAT14N-乙酰轉(zhuǎn)移mei14elisa kitHuman N-Acetyltransferase 14(NAT14)ELISA Kit

人N-乙酰轉(zhuǎn)移mei10(NAT10)ELISA試劑盒NAT10N-乙酰轉(zhuǎn)移mei10ELISA試劑盒Human N-Acetyltransferase 10(NAT10)ELISA Kit

人N-乙酰神經(jīng)氨酰suan合mei(NANS)ELISA試劑盒NANSN-乙酰神經(jīng)氨酰suan合meielisamei聯(lián)免疫試劑盒Human N-Acetylneuraminic Acid Synthase(NANS)ELISA Kit

人N-乙酰葡糖胺激mei(NAGK)ELISA試劑盒NAGKN-乙酰葡糖胺激meielisa檢測試劑盒Human N-Acetylglucosamine Kinase(NAGK)ELISA Kit

人N-乙酰硫suan酯mei(GAS)ELISA試劑盒GASN-乙酰硫suan酯meielisa kitHuman N-Acetylgalactosamine-6-Sulfatase(GAS)ELISA Kit