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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-03-22 22:40:52瀏覽次數(shù):215次

聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100mL/125mL×4
貨號(hào) YS-02X10102 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研使用
視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品:MYC啟動(dòng)子結(jié)合蛋白1抗體Anti-phospho-Pyk2 (Tyr881) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化富含脯的酪酶2抗體IgG
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白29抗體Anti-FAM3A/FITC 熒光素標(biāo)記胰腺衍生因子抗體IgG
烯脂酰A水解酶抗體Anti-FAM3B/PANDER /FITC 熒光素標(biāo)記胰腺衍生因子抗體IgG
磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體An

細(xì)胞特性:

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱:視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格:100mL/125mL×4
貨號(hào):YS-02X10102

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) :細(xì)胞生長(zhǎng)良好,形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件:2℃-8℃,避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件:冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

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細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng):

1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;

2)凍存的密度不宜過(guò)低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。

3)消化和吹打,切忌胰酶消化過(guò)度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。

4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過(guò),問(wèn)題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。

5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過(guò)夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟:

一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線,加熱溶解,補(bǔ)充水分,測(cè)定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

(三)過(guò)濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。

(四)分裝:將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。

(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),殺菌效果好。

Phospho-eNOS (Ser113)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化一氧化氮合成酶3抗體(內(nèi)皮型)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

 Zyxin/FITC 熒光素標(biāo)記斑聯(lián)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

β-連環(huán)蛋白抗體  β-catenin/β-cats 0.1ml

Goat  Guinea pig IgG/PE PE標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml

FbxW2 英文名稱: FbxW2蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Podoplanin Protein/gp36 平足蛋白抗體(管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白) 規(guī)格 0.1ml

 Zyxin/FITC 熒光素標(biāo)記斑聯(lián)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Substance P 小鼠P物質(zhì)Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

 FBN1 原纖維蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse  rat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格 0.1ml

CLU(Human clusterin) ELISA Kit 人凝聚素 96T

SLP76 英文名稱: 細(xì)胞胞漿蛋白2抗體 0.1ml

C4orf22 英文名稱: 4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框22抗體 0.2ml

 FBN1 原纖維蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Goat  rat IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml

FUS 英文名稱: 粘液樣脂肪肉瘤蛋白FUS1抗體 0.2ml

CC趨化因子受體2/5抗體  CCR-2/5 0.2ml

 NPM/FITC 熒光素標(biāo)記核仁磷酸蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PNPLA1 含patatin樣磷脂酶1抗體 規(guī)格 0.2ml

 Gentamicin/Gold 膠體金離子標(biāo)記兔慶大霉素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.5ml(35nm-40nm)
視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基細(xì)胞甘油三脂脂酶法格莫瑞(Gomori)染色試劑盒50次人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒,

石蠟切片甘油三脂脂酶法格莫瑞(Gomori)間接染色試劑盒10次人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA試劑盒, TLa ELISA kit

石蠟切片甘油三脂脂酶法格莫瑞(Gomori)直接染色試劑盒50次人抗紡錘體抗體(MSA)ELISA試劑盒,MSA ELISA

凍切片甘油三脂脂酶法格莫瑞(Gomori)染色試劑盒50次人二氧化酶(DAO)ELISA試劑盒,DAO ELISA

細(xì)胞脂肪酸費(fèi)斯克勒(Fischler)染色試劑盒50次人白調(diào)節(jié)素(LR)ELISA試劑盒,

凍切片脂肪酸費(fèi)斯克勒(Fischler)染色試劑盒50次人胰高血糖素(GC)ELISA試劑盒,

石蠟切片脂肪酸費(fèi)斯克勒(Fischler)間接染色試劑盒10次小鼠羥脯(Hyp)ELISA試劑盒,

石蠟切片脂肪酸費(fèi)斯克勒(Fischler)直接染色試劑盒50次大鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒,

細(xì)胞磷脂皮爾斯(Pearse)染色試劑盒50次白介素2(IL-2)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人

凍切片磷脂皮爾斯(Pearse)染色試劑盒50次抗酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA酶聯(lián)吸附試劑盒--專賣

石蠟切片磷脂皮爾斯(Pearse)間接染色試劑盒10次Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒 -Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒

石蠟切片磷脂皮爾斯(Pearse)直接染色試劑盒50次柴胡皂苷A Saikosaponin A

細(xì)胞磷脂尼羅紅(Nile Red)熒光染色試劑盒50次3,3,-二氨基聯(lián)片劑

凍切片磷脂尼羅紅(Nile Red)熒光染色試劑盒50次微量可調(diào)八道移液器P10

石蠟切片磷脂尼羅紅(Nile Red)間接熒光染色試劑盒10次硅膠60G

 


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