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上海研生實業(yè)有限公司
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隱襲腐霉探針法熒光定量PCR試劑盒

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產(chǎn)品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2020-09-30 10:23:12瀏覽次數(shù):500次

聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號 YSP7127 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
隱襲腐霉探針法熒光定量PCR試劑盒所謂實時熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標(biāo)準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:隱襲腐霉探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Pythium insidiosum
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。
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實驗過程:
一、隱襲腐霉探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
98%5g100g帕克醇529599antidouble stranded DNA

川芎嗪 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg 人Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒,英文名:8-iso-PG ELISA Kit

Raddeanin A貝那普利相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準品規(guī)格:規(guī)格:人醛脫氫酶2(ALDH2)Polyclonal Antibody 0.2ml

APCR(Human activated protein C resistance) ELISA Kit  人活化蛋白C抵抗素CAS號:5727085氨基酰合成酶檢測試盒100mgHuman/人Elisa試盒31430189

98%5g1g三七皂苷T585026557glomerular basement membrane antibogy

去氧紫草素 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg HERC4 E3泛素蛋白連接酶抗體 PTPRH ELISA Kit 蛋白酪氨酶受體H(PTPRH)ELISA試劑盒

Hedera saponin B貝那普利相關(guān)雜質(zhì)B標(biāo)準品規(guī)格:規(guī)格:人水通道蛋白4(AQP-4)Polyclonal Antibody 0.2ml

人脂多糖(LPS)DOK5/IRS6  胞漿接頭蛋白Dok5抗體規(guī)格:96T/48TBenzoic Acid規(guī)格:20mgα戊二脫氫酶檢測試盒20mg人胃腺癌細胞,AGS細胞1x10^6cells

99%100g25g過化物酶(辣根)Colletin10

 小鼠胰島細胞*培養(yǎng)基100mL

Sporulation Broth產(chǎn)氣莢膜梭菌的產(chǎn)芽孢培養(yǎng)低氧誘導(dǎo)子1檢測試盒20mg神經(jīng)元烯醇化酶檢測試盒Renin

99%500g100g過化物酶(辣根)GrowthRegulated protein alpha

草甘膦(分析標(biāo)準品,99.5%) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準品,99.5% N-(Phosphonomethyl)glycine

Hektoen Enteric Agar用于沙門氏菌屬和志賀菌屬的分離培養(yǎng)精漿彈性硬蛋白酶檢測試盒20mg素檢測試盒g(shù)rowthdifferentiationfactot15

99%25g25g過化物酶(辣根)GrowthRegulated protein β

 志賀氏菌增菌肉湯配套試劑 規(guī)格: 10支 用途: 每支添加于225mL的志賀氏菌增菌肉湯(023141)中。

KIA腸桿菌科的初步鑒定精漿彈性硬蛋白酶檢測試盒20mg生長分化子15檢測試盒g(shù)rowthhormone
隱襲腐霉探針法熒光定量PCR試劑盒鹽甲氯芬酯(標(biāo)準品)Sarcosine ethyl ester hydrochloride,99%5G通用試劑

醋甲地孕Riboflavin 5′phosphate sodium salt h...5G通用試劑

醋甲地孕(標(biāo)準品)Sarcosine methyl ester hydrochloride,...5G通用試劑

美拉諾坦II;MTIIThymol Blue sodium salt1G通用試劑

美洛昔康Melatonin,≥98%250MG通用試劑

美洛昔康(標(biāo)準品)LLeucinol,96%5G通用試劑

鹽美金剛BocArg(NO2)OH,≥98.5%5G通用試劑

鹽美金剛(標(biāo)準品)FmocDAsnOH,≥98.0%1G通用試劑

甲氨蝶呤FmocDMetOH5G通用試劑

甲氨蝶呤(標(biāo)準品)ZGlyProArg PNA acetate salt5MG通用試劑

尼美舒利OAcetylLserine hydrochloride100MG通用試劑

咪康唑2Hydroxyethyl)βCyclodextrin,≥99.0%25G通用試劑

咪康唑(標(biāo)準品)Methylβcyclodextrin1G通用試劑

小諾/小諾米星/沙加1Aminobenzotriazole100MG通用試劑

小諾(標(biāo)準品)D(+)Galacturonic acid monohydrate,≥...1G通用試劑

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