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雜色青霉探針法熒光定量PCR試劑盒

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產(chǎn)品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-09-30 09:46:25瀏覽次數(shù):315次

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CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號 YSP7068 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
雜色青霉探針法熒光定量PCR試劑盒是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。

實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板;
(2)引物與模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
【產(chǎn)品名稱】雜色青霉探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Penicillium versicolor
【產(chǎn)品編號】YSP7068
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測,所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,可通過實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),針對鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,通過實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針法)對鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,擴(kuò)增β-actin基因,與同類產(chǎn)品相比,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號更強(qiáng),擴(kuò)增效率更高。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
雜色青霉探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
98%25g25g6基7異戊基香豆素94804Metallothionein

慶大霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 Gentamicin sulfate  V-P半固體瓊脂/Voges-Proskauer Semisolid Agar細(xì)菌V-P試驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

白介素1β(IL1β)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 PDHA1 / C54G1 蛋白 (aa 30-390, His & GST 標(biāo)簽)*250(g)

人性成纖維細(xì)胞生長子(FGF1)BarX1  BarX1蛋白抗體規(guī)格:96T/48TAspartame規(guī)格:200mgRho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激酶5檢測試盒20mg人胚上皮細(xì)胞,293A細(xì)胞1x10^6cells

98%1g1g3'O去基牛蒡子苷元staphylococcus aureus ent

馬來氨地平 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Amlodipine maleate 苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti甜菜莖點(diǎn)霉

白介素2(IL2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 ATP1B1 蛋白 (His 標(biāo)簽)*250(g)

人FASLGOLPH2/GP73  高爾基體膜蛋白GP73抗體規(guī)格:96T/48T規(guī)格:500mgRNA結(jié)合基序蛋白6檢測試盒20mg人胚細(xì)胞,293FT細(xì)胞1x10^6cells

98%5g5g胃蛋白酶(豬胃粘膜)vacuolar H+ATPase

吡嘧磺隆(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99% Pyrazosulfuron

Peptone Water Medium用于靛基質(zhì)試驗(yàn)β半乳糖苷酶檢測試盒20mg過氧化氫酶檢測試盒peroxiredoxin2

99%25g1g胃蛋白酶(豬胃粘膜)HMGCoA

多聚賴氨 質(zhì)量規(guī)格:BR Poly-L-lysine A-427(人肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Alkaline Peptone Water副溶血性弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)景天庚糖1,7二酶檢測試盒20mg過氧化物還原酶2檢測試盒reducedglutathione

99%100g5g胃蛋白酶(豬胃粘膜)Hepatitis A virus IgG antibody

木蝴蝶苷B 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg 9號染色體開放閱讀框30抗體 SRP ELISA Kit 人抗信號識別顆??贵w(SRP)ELISA試劑盒

Strain Store Medium常用細(xì)菌斜面?zhèn)鞔xIgG抗體檢測試盒20mg還原型谷胱甘肽檢測試盒NuclearfactorkappaB
雜色青霉探針法熒光定量PCR試劑盒11O羅漢果苷V CAS號: 126105111 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

二咖酰菊苣 CAS號: 70831560 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

3,4,5三咖??鼘?CAS號:  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

5,7二羥色原 CAS號: 31721945 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

伽升沃 D CAS號: 107390089 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

伽升沃 C CAS號: 76996275 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

鉤吻素;鉤吻堿 CAS號: 509159 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

鉤吻素子 CAS號: 1358765 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

葫蘆素E CAS號: 18444661 規(guī)格: HPLC≥95%;20mg 訂購|咨詢

通關(guān)藤苷H CAS號: 191729449 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

野漆樹苷 CAS號: 17306466 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

百兩金素A CAS號: 23643610 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

氧代川南亭堿 CAS號:  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

苔黑葡萄糖苷;地衣二葡萄糖苷 CAS號: 21082337 規(guī)格: HPLC≥97%;20mg 訂購|咨詢

7O葡萄糖苷 CAS號: 16290076 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

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