在進(jìn)行科學(xué)研究時，細(xì)胞培養(yǎng)作為一項(xiàng)基本的研究方法，經(jīng)常會被用到?？杉?xì)胞培養(yǎng)到底是什么樣的過程呢？下面是我們的實(shí)驗(yàn)員培養(yǎng)細(xì)胞的心得體會：一養(yǎng)細(xì)胞深似海，從此自由是路人。開始養(yǎng)細(xì)胞之前就要做好隨時照顧它的心理準(zhǔn)備，三天打魚兩天曬網(wǎng)不僅無法養(yǎng)出狀態(tài)的細(xì)胞，還有可能讓嬌貴的細(xì)胞寶寶全軍覆沒，那么，怎么才能培養(yǎng)出符合條件的細(xì)胞呢？
1、選擇正確的培養(yǎng)基
在養(yǎng)細(xì)胞之前，就要了解，你所養(yǎng)細(xì)胞的來源以及種類和名稱，查閱一定量的文獻(xiàn)，確定所需培養(yǎng)液種類以及是否需要添加特殊成分，常用的細(xì)胞培養(yǎng)液有DMEM、RPMI1640、F12等等，一些常見的細(xì)胞基本可以使用這幾種培養(yǎng)基中的一種來培養(yǎng)，有的需要加入一定其他成分，這需要根據(jù)不同的細(xì)胞類型，查ATCC細(xì)胞庫或者查文獻(xiàn)，才能找到所需*培養(yǎng)液。選擇正確的培養(yǎng)液是養(yǎng)好細(xì)胞的*步。
2、了解細(xì)胞的生長習(xí)性
不同的細(xì)胞生長習(xí)性不同。如成纖維細(xì)胞是貼壁生長，有一定的密度依賴性，密度小可能會出現(xiàn)不增殖，狀態(tài)差的情況，接種密度大時則需要隔天傳代，頻繁傳代則影響細(xì)胞狀態(tài)；再如RPMI-8226人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞，是懸浮生長的，傳代需離心棄去上清即可?？傊?，了解細(xì)胞生長習(xí)性，再加上正確的計(jì)數(shù)，才能掌握好傳代的密度。
3、選擇的血清
血清中含有細(xì)胞生長所必須的生長因子，作為哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)的附加物，血清的添加是十分重要的，因此，選擇的血清，是細(xì)胞養(yǎng)殖成功與否的關(guān)鍵！
4、及時傳代和更換培養(yǎng)液
在細(xì)胞增殖到一定的密度后，要及時傳代，根據(jù)細(xì)胞的生長速度和密度，及時更換培養(yǎng)液。更換過勤，浪費(fèi)培養(yǎng)液，更換不夠及時，則細(xì)胞狀態(tài)轉(zhuǎn)差，一般需隔天更換培養(yǎng)液，具體可根據(jù)所養(yǎng)細(xì)胞種類予以調(diào)整。
5、的無菌意識
前面林林總總?cè)慷甲⒁夂昧耍绻麩o菌意識差，細(xì)胞中混入了微生物，則千里之堤潰于蟻穴，細(xì)菌的生長速度和破壞力，將迅速占領(lǐng)培養(yǎng)皿，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，有些初學(xué)者會在培養(yǎng)液中加入1%的雙抗，但是，無菌意識不強(qiáng)，雙抗亦無法拯救你的細(xì)胞！
6、傾心的呵護(hù)，頻繁的觀察
做到以上幾點(diǎn)，就可以開始養(yǎng)你的細(xì)胞了，但是再次重申細(xì)胞嬌弱，在養(yǎng)細(xì)胞的過程中，難免會出現(xiàn)一些意想不到的問題，要想成功養(yǎng)好細(xì)胞，時時惦記它 ，頻繁地觀察，初期一天觀察2次都不足為過，出現(xiàn)任何預(yù)料外的情況，及時處理，才能保障收獲一盤“漂亮”的細(xì)胞。
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