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牛血清白蛋白能維持蛋白的穩(wěn)定性

閱讀:3295      發(fā)布時(shí)間:2019-5-26
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      牛血清白蛋白是生化實(shí)驗(yàn)室常用的蛋白之一,而實(shí)驗(yàn)中,可能因?yàn)樗^于常見、過于平凡而忽略了它的重要性。牛血清白蛋白(BSA),又稱第五組分,是牛血清中的一種球蛋白,包含583個(gè)氨基酸殘基,分子量為66.430kDa,等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用,例如在westernblot中作為Blockingagent。
  牛血清白蛋白前體蛋白全長607個(gè)氨基酸。前體蛋白從N端脫去18個(gè)信號(hào)肽,以及6個(gè)前肽,形成含有583個(gè)氨基酸、分子量約為66.5kDa的成熟BSA蛋白。BSA表面含有大量的酸性、堿性氨基酸。其中酸性氨基酸谷氨酸、天冬氨酸分別有40個(gè)、59個(gè),堿性氨基酸賴氨酸、精氨酸分別有59個(gè)、23個(gè)。另外BSA還有35個(gè)半胱氨酸,形成17對(duì)二硫鍵,一個(gè)游離的巰基。
  當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)處于“壓力”的狀態(tài)下,如加熱、紫外照射、氧化、剪切力等,蛋白質(zhì)的空間折疊趨于延展,導(dǎo)致內(nèi)部疏水位點(diǎn)暴露,發(fā)生無定形聚集或者形成高結(jié)構(gòu)化的淀粉樣蛋白,從而失去生物活性。BSA具有良好的熱穩(wěn)定性,當(dāng)溫度上升至65度時(shí),其空間結(jié)構(gòu)的變化依然是可逆的。BSA另一個(gè)特點(diǎn)是能夠和許多物質(zhì)形成可逆結(jié)合,特別是水溶性較差的物質(zhì),如脂肪酸、血紅素、膽紅素、帶負(fù)電荷的芳香化合物等,能夠增加其水溶性。因此,BSA是理想的蛋白保護(hù)劑。當(dāng)酶、或抗體等蛋白質(zhì)發(fā)生空間結(jié)構(gòu)變化,BSA能夠與其發(fā)生可逆結(jié)合,形成穩(wěn)定的、可溶的高分子復(fù)合物,防止蛋白發(fā)生無定形聚集。另外,溶液中的BSA能夠與容器表面結(jié)合,防止蛋白吸附在容器表面而濃度降低。

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