一眨眼已經(jīng)到了三月中旬了,想必各位老師渡過了一個學(xué)生時代長的寒假,假是放舒服了,可這實驗可怎么辦呢,
怎么樣才能快速結(jié)束自己的實驗并有一個好的結(jié)果呢,小愛不忍大家在家里著急上火,獻給大家小愛六字真言:
多 色 組 化 服 務(wù) !
多重?zé)晒饷庖呓M化(mIHC)實驗原理
TSA 技術(shù) (Tyramide Signal Amplification™,酪胺信號放大技術(shù)):簡單來說,用該方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的 HRP(而不是直接偶聯(lián)熒光素),來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。
熒光素在 HRP 和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯(lián),使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。
然后微波處理,前一輪非共價結(jié)合的抗體被洗掉,共價結(jié)合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育,周而復(fù)始。等到所有抗體孵育結(jié)束,熒光素都結(jié)合好后,后去檢測結(jié)果。
由于每次體系中都只有單一抗體孵育,因此無需擔(dān)心抗體交叉反應(yīng),以及一抗二抗種屬匹配問題,大大減少了實驗設(shè)計時不同種屬抗體選擇匹配的限制。
也就是說,如果用 TSA 技術(shù),同一張片子上所有的靶標(biāo)都可以選用特異性高的兔單克隆抗體。搭配同一支抗兔的 HRP 二抗就可以進行實驗,而且信號放大的倍數(shù)大大增強。
熒光法多重免疫組化,可同時進行五個顏色通道以上,這種情況下發(fā)射光譜會重疊,我們可以借助多光譜成像系統(tǒng)來解決這個問題。這是傳統(tǒng)間接熒光法染色和顯色法多重免疫組化所做不到的。而且還能真實反映關(guān)鍵蛋白的表達情況和相互之間的關(guān)系,從而極大地節(jié)約珍貴的樣品。
有困難,找小愛,輕松畢業(yè)不慌張~
愛必信熱賣免疫組化產(chǎn)品推薦:
實驗步驟 | 推薦指數(shù) | 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
樣本制備 | abs9134 | Formaldehyde | 25ml,500ml,1L,4L | 固定液 | |
★★★★★ | abs9179 | 4%多聚甲醛/通用型組織固定液 | 500ml | 固定液 | |
★★★ | abs9131 | Chromium(III) potassium sulfate dodecahydrate | 5g,100g | 處理玻片防脫片 | |
★★★ | abs9172 | Poly-D-lysine (Mw 150,000-300,000) | 25mg | 處理玻片防脫片 | |
★★★ | abs9135 | Gelatin | 100g,500g | 處理玻片防脫片 | |
輔助試劑 | abs9256 | 10×TBS | 500ml | 緩沖液 | |
abs952 | 10*TBST | 100ml,1L | 緩沖液 | ||
abs961 | 10×PBS緩沖液 | 500ml,500ml*10 | 緩沖液 | ||
abs962 | 1×PBS緩沖液 | 500ml,500ml*10 | 緩沖液 | ||
abs9149 | Triton X-100/曲拉通X-100 | 100ml,500ml | 緩沖液 | ||
抗原修復(fù) | abs9145 | Pepsin(1:3000) | 50g,100g | 抗原修復(fù)液 | |
abs9118 | Proteinase K | 100mg,1g | 抗原修復(fù)液 | ||
★★★ | abs9247 | EDTA抗原修復(fù)液(50×) | 100ml | 抗原修復(fù)液 | |
★★★ | abs9207 | 冰凍切片快速抗原修復(fù)液(5×) | 100ml | 抗原修復(fù)液 | |
★★★ | abs9249 | 檸檬酸鈉-EDTA抗原修復(fù)液(40×) | 100ml | 抗原修復(fù)液 | |
★★★ | abs9248 | 檸檬酸鈉抗原修復(fù)液(50×) | 100ml | 抗原修復(fù)液 | |
★★★ | abs9208 | 細(xì)胞爬片抗原修復(fù)液(1X) | 100ml,500ml | 抗原修復(fù)液 | |
封閉 | abs933 | Goat serum | 10ml,50ml | 封閉血清 | |
abs936 | Horse serum | 200ml(2*100ml) | 封閉血清 | ||
abs939 | Normal Monkey serum | 100ml | 封閉血清 | ||
abs937 | Normal mouse serum | 100ml | 封閉血清 | ||
abs946 | Rabbit serum | 10ml,50ml | 封閉血清 | ||
abs947 | Rat serum | 100ml | 封閉血清 | ||
abs935 | The ass/donkey serum | 10ml,50ml | 封閉血清 | ||
abs9155 | 牛血清白蛋白(BSA) | 50g,100g | 封閉液 | ||
抗體孵育 | ★★★★★ | abs957 | 即用型高效免疫組化二抗試劑盒 | 5ml | 二抗試劑盒 |
★★★★★ | abs929 | PAP Pen 組化筆 | 1支 | 組化筆 | |
顯色/復(fù)染 | ★★★★★ | abs9210 | DAB 顯色試劑盒(棕黃色,IHC) | 1kit | 顯色試劑 |
★★★ | abs47047616 | DAPI染色液 | 10ml,50ml | 熒光染料 | |
abs9105 | Propidium Iodide | 5mg,10mg | 熒光染料 | ||
abs9140 | Methyl Green, 0.1% w/v aq. soln. | 100ml | 熒光染料 | ||
abs9142 | Nuclear Fast Red | 5g | 熒光染料 | ||
★★★★ | abs9217 | 蘇木素-伊紅(HE)染色試劑盒 | 10g,25g | 熒光染料 | |
封片 | abs9177 | 中性樹膠(鏡檢用封片劑) | 100ml | ||
abs9234 | 抗熒光淬滅封片液 | 5ml | |||
abs9235 | 抗熒光淬滅封片液(含DAPI) | 5ml,25ml | |||
abs9236 | 抗熒光淬滅封片液(含PI) | 1ml |
愛必信特色產(chǎn)品線(全部現(xiàn)貨): 二抗、標(biāo)簽抗體、對照抗體;WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;細(xì)胞因子、信號通路調(diào)節(jié)劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒、呼吸爆發(fā)試劑盒;動植物提取物,定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白)... |
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