背景介紹
酶聯(lián)免疫分析技術(shù)(ELISA)廣泛應(yīng)用于抗原、半抗原或抗體的定量或定性分析,辣根過(guò)氧化物酶(HRP)是 ELISA 技術(shù)常用的一種酶,能催化底物如 3,3'5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)發(fā)生顯色反應(yīng),從而進(jìn)行定量或定性分析。
由于 TMB 比其他顯色底物具有更高的靈敏度且無(wú)致癌性、故而被廣泛使用,TMB 主要應(yīng)用于 ELISA、WB、免疫斑點(diǎn)雜交或免疫組化等實(shí)驗(yàn),也有報(bào)道將其用于氯的檢測(cè)分析等。
TMB工作原理
HRP 或其他適當(dāng)過(guò)氧化物酶能催化TMB生成可溶的藍(lán)色產(chǎn)物, 此時(shí)通??稍?nbsp;370nm 測(cè)定吸光度。當(dāng)顯色反應(yīng)被酸性溶液(如 0.5-2M H2SO4,0.5M HCl,1M H3PO4)終止后,產(chǎn)物由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色,此時(shí)可在 450nm 測(cè)定吸光度。
傳統(tǒng)TMB顯色液(雙組分)
通常 TMB 顯色試劑以雙組分(A/B液)的形式提供,分別含H2O2和TMB,需要在使用前按1:1比例配制,具有以下缺點(diǎn):
▲較容易產(chǎn)生沉淀;
▲使用起來(lái)相對(duì)不便;
▲較易導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果誤差。
愛(ài)必信單組分TMB顯色液優(yōu)勢(shì)
作為高品質(zhì)生命科學(xué)產(chǎn)品的中國(guó)品牌,愛(ài)必信生物研發(fā)推出的abs9178 單組分TMB顯色液,顯色試劑由單一溶液組成,有效簡(jiǎn)化了操作步驟,并且檢測(cè)結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。其具有以下優(yōu)勢(shì):
▲即用型溶液,含H2O2和TMB,單組分溶液形式,無(wú)需混合,方便快捷減少誤差;
▲檢測(cè)靈敏度高,線(xiàn)性濃度范圍寬;
▲含優(yōu)化的穩(wěn)定劑,2-8℃避光保存,有效期24個(gè)月以上;
▲低背景,質(zhì)量穩(wěn)定,批間差異小。
使用方法
▲使用之前,取出適量單組分 TMB 顯色液,使其恢復(fù)到室溫再開(kāi)始使用;▲
▲參考 ELISA 檢測(cè)試劑盒的實(shí)驗(yàn)步驟,當(dāng)與 HRP 標(biāo)記抗體孵育一段時(shí)間后,用適當(dāng)洗滌液洗滌 3-5 次, 每次 3-5min;
▲洗滌完畢后,去除洗滌液,加入 100μl 單組分 TMB 顯色液;
▲室溫避光孵育 5-30min 或更長(zhǎng)時(shí)間(可長(zhǎng)達(dá) 24h),直至顯色到預(yù)期深淺?!咀⒁狻浚航ㄗh根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇比較佳試劑用量、顯色時(shí)間和反應(yīng)溫度;
▲直接在 370nm 測(cè)定吸光度?;蛘呒尤?nbsp;100μl 0.5-2M H2SO4 終止反應(yīng),隨后在 450nm 測(cè)定吸光度。
訂購(gòu)信息:
貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
abs9178 | 單組分TMB顯色液(ELISA,HRP顯色用) | 100ml | 353 |
abs9191 | TMB Stop Solution (450nm);TMB 終止液(450nm) | 100ml | 431 |
abs9194 | 單組分 TMB 顯色液(膜印跡,HRP 顯色用) | 100ml | 370 |
更多優(yōu)質(zhì)即用型ELISA試劑盒產(chǎn)品請(qǐng)點(diǎn)擊:
ElISA試劑盒
愛(ài)必信特色產(chǎn)品線(xiàn)(全部2000):二抗、標(biāo)簽抗體、對(duì)照抗體;WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;細(xì)胞因子、信號(hào)通路調(diào)節(jié)劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒、呼吸爆發(fā)試劑盒;動(dòng)植物提取物,定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白)...
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
立即詢(xún)價(jià)
您提交后,專(zhuān)屬客服將第一時(shí)間為您服務(wù)