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蛋白印跡(Western Blot)實驗中的內參

閱讀:3836      發(fā)布時間:2020-5-22
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蛋白質印跡(WB)用于測量不同條件下特定蛋白的變化。在蛋白質印跡(WB)過程中涉及許多步驟,包括樣品制備、電泳、蛋白轉移、抗體孵育和信號檢測。為了解釋蛋白質印跡實驗的結果,一個貫穿全過程的內參是必須的。

內參可保證每個泳道中加入了相同量的蛋白樣品,不同泳道上的蛋白以相同的效率從凝膠轉到膜上,不同泳道上抗體孵育(對于一抗而言,必要的話也包括二抗)、信號檢測都是一致的。

內參的信號通常用來對目標蛋白的信號進行標準化。需要強調的是,對照蛋白抗體應該與實驗抗體在相同的印跡上進行。

不同的樣品制備需要不同的內參。下面總結了針對不同樣品制備常用的內參,包括全細胞/胞漿蛋白、線粒體、核蛋白、植物組織和血清樣本。


針對不同樣品制備常用的內參以及它們的分子量


 

蛋白質印跡(Western Blot)實驗中產品推薦: 

實驗步驟  推薦指數  貨號  產品名稱  規(guī)格
樣本制備   abs9228  RIPA (中)  100ml
   abs9229  RIPA (強)  100ml
   abs9230  RIPA (弱)  100ml
   abs9231  RIPA (強,無抑制劑)  100ml
   abs9160  NP-40  100ml
   abs9195  1M Tris-HCl,pH6.8  1L
   abs9201  1M Tris-HCl,pH8.8(更多pH請看愛必信網站)  1L
   abs9117  SDS  100ml
  ★★  abs9116  WB/IP 細胞裂解液  100ml
  ★★  abs9239  WB/IP 細胞裂解液(無抑制劑)  100ml
  ★★★★  abs9101  紅細胞裂解液  100ml,250ml,500ml
   abs812852  PMSF  50mg,100mg,200mg
   abs816442  Aprotinin 抑肽酶 10mg,25mg,50mg,100mg
   abs817902  Peptatin 胃蛋白酶抑制劑A 10mg,25mg,50mg,100mg
   abs9133  EDTA  100ml
   abs42017684  EGTA  1g,10g
   abs817431  原釩酸鹽  100mg,500mg
   abs47014865  β-甘油磷酸鹽  10g,25g
  ★★  abs9161  廣譜型蛋白酶抑制劑混合物  1ml
  ★★  abs9162  廣譜型磷酸酶抑制劑混合物  1ml
蛋白定量  ★★  abs9232  BCA蛋白定量試劑盒  500次,2500次
  ★★  abs9233  增強型BCA 蛋白定量試劑盒  500次
上樣與電泳   abs9226  DTT溶液(1mol/L)  5ml,10ml
   abs9237  2X Laemmli樣品緩沖液  5ml*2
   abs9238  10%SDS十二烷基硫酸鈉溶液  500ml
  ★★  abs953  2*上樣緩沖液 (適用于SDS-PAGE)  10ml
  ★★  abs9301  預制膠 10%,10 wells  5片/盒
  ★★  abs9308  預制膠 10%,15 wells  5片/盒
  ★★  abs9302  預制膠 12%,10 wells  5片/盒
  ★★  abs9309  預制膠 12%,15 wells  5片/盒
   abs9303  預制膠 15% ,10 wells  5片/盒
   abs9310  預制膠 15% ,15 wells  5片/盒
   abs9304  預制膠 4-15%, 10 wells  5片/盒
   abs9311  預制膠 4-15%, 15 wells  5片/盒
  ★★  abs9305  預制膠 4-20%, 10 wells  5片/盒
  ★★  abs9312  預制膠 4-20%, 15 wells  5片/盒
   abs9307  預制膠 8%, 15 wells  5片/盒
   abs9306  預制膠 8-20%, 10 wells  5片/盒
   abs9313  預制膠 8-20%, 15 wells  5片/盒
  NEW  abs9328  3-5kd小分子量預制膠,16.5%,10wells  10片/盒
  NEW  abs9329  3-5kd小分子量預制膠,16.5%,15wells  10片/盒
  ★★★  abs925  蛋白電泳套裝  
   abs951  running buffer  100ml,1L
  ★★★★★  abs923  預染蛋白marker, 10-245 KDa  500ul,5*500ul
  ★★★★★  abs924  預染蛋白marker, 10-180 kDa  250ul,2*250ul
   abs966  Genshare考馬斯亮藍蛋白膠快速染色液  500ml
  ★★★  abs964  考馬斯亮藍染色試劑盒(常規(guī)型)R250  1kit
   abs965  考馬斯亮藍染色試劑盒(增強型)G250  1kit
轉膜   abs931  PVDF膜0.2 μm  20張
  ★★  abs932  PVDF膜0.45 μm  20張
  ★★  abs959  NC膜0.2 μm  20張
   abs960  NC膜0.45 μm  20張
   abs950  10*電轉液  100ml,1L
封閉   abs9174  脫脂奶粉  100g,500g
  ★★★★★  abs9155  BSA  50g,100g
一抗孵育  ★★  abs830031  Beta actin antibody   50ul,100ul
   abs132001  Beta actin antibody   50ug,100ug
   abs119680  Beta Actin Polyclonal Antibody  50ul,100ul
   abs132184  Beta-Actin antibody  50ug,100ug
   abs137975  Beta-Actin Mouse Monoclonal Antibody  50ug,100ug
  ★★  abs830030  GAPDH antibody  50ul,100ul
   abs132004  GAPDH antibody  50ug,100ug
   abs137959  GAPDH Mouse Monoclonal Antibody  50ug,100ug
   abs118936  GAPDH Polyclonal Antibody  50ul,100ul
   abs131993  Tubulin alpha Antibody  50ug,100ug
  ★★  abs830032  Tubulin Beta antibody  50ul,100ul
   abs131994  Tubulin beta Antibody  50ug,100ug
   abs125209  Tubulin Beta Polyclonal Antibody  50ul,100ul
二抗孵育  ★★  abs928  Goat anti-mouse IgG-HRP  100ul,500ul,1ml
  ★★  abs20002  Goat anti-rabbit IgG-HRP  100ul,500ul,1ml
  ★★  abs20003  Goat anti-Mouse IgG-FITC  1ml,500ul,100ul
  ★★  abs20004  Goat anti-Rabbit IgG-FITC  100ul,500ul,1ml
  ★★  abs20005  Rabbit anti-Goat IgG-HRP  100ul,500ul,1ml
一抗孵育   abs830001  Anti- GST  50ul,100ul
   abs830002  Anti- His Tag抗體  50ul,100ul
   abs830003  Anti- His(C-terminal Specific) 抗體  50ul,100ul
   abs830004  Anti- Myc 抗體  50ul,100ul
   abs830005  Anti- DYKDDDDK  50ul,100ul
   abs830006  Anti- HA 抗體  50ul,100ul
   abs830008  Anti-V5,mAb  50ul,100ul
   abs830010  Anti- GST,HRP  50ul
   abs830011  Anti- His Tag (HRP) 抗體  50ul
   abs830012  Anti- His(C-terminal Specific) (HRP) 抗體  50ul
   abs830013  Anti- Myc (HRP) 抗體  50ul
   abs830014  Anti- DYKDDDDK,HRP  50ul
   abs830015  Anti- HA (HRP) 抗體  50ul
   abs830016  Anti- V5 (HRP) 抗體  50ul
   abs137956  C-Myc-Tag Mouse Monoclonal Antibody  50ug,100ug
   abs137958  Flag-Tag Mouse Monoclonal Antibody  50ug,100ug
顯色  ★★★★★  abs920   ECL化學發(fā)光檢測試劑盒  2*25ml,2*50ml,2*250ml
   abs9212  DAB 顯色試劑盒(棕黃色,WB)  1kit
   abs9213  DAB 顯色試劑盒(紫藍色,WB)  1kit
其他輔助試劑   abs952  10*TBST  100ml,1L
   abs9152  Tween-20  500ml
  ★★  abs954  WB一抗二抗稀釋液  100ml
   abs969  Western一抗二抗去除液(中性)  250ml
   abs968  Western一抗二抗去除液(弱堿性)  250ml
   abs967  Western一抗二抗去除液(強堿性)  250ml
新手*  ★★★★★  abs926  WB solution base kit(rabbit)  1kit
  ★★★★★  abs927  WB solution base kit(mouse)  1kit
  ★★★★★  abs928  WB solution base kit(goat)  1kit

 

Absin特色產品線:
WB相關:ECL發(fā)光液、預染marker、預制膠;IHC相關:二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;激動劑/抑制劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒;呼吸爆發(fā)試劑盒;ELISA試劑盒;重組蛋白;抗體: 二抗、標簽抗體、對照抗體;定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...

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