SARS-CoV-2（coronavirus disease 2019）疫情暴發(fā)以來，各個國家采取了多種控制措施，但仍造成了大量的感染和死亡病例。世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，截至2023年2月3日，全球SARS-CoV-2累計確診病例7.54億例，死亡病例達到681萬例。目前，雖然我國已經(jīng)解除對SARS-CoV-2采取的甲類傳染病管控措施，但是SARS-CoV-2（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）仍然在變異，重復(fù)感染的風險仍然存在。疫苗接種和抗病藥物的使用是控制傳染病的有效手段。而疫苗被認為是全球戰(zhàn)勝SARS-CoV-2疫情的最終希望。
自SARS-CoV-2疫情爆發(fā)以來，滅活疫苗、重組蛋白亞單位疫苗、病毒載體疫苗、DNA載體疫苗和mRNA疫苗等五大技術(shù)路線的過百個疫苗研發(fā)項目在全球緊急啟動。mRNA疫苗相比于其他類型的疫苗，具有安全性高、生產(chǎn)成本低、生產(chǎn)周期短，能更好滿足全球疫情對疫苗劑量的迫切需求以及易于開發(fā)針對變異病毒株新疫苗等優(yōu)勢，已在全球掀起了研發(fā)高潮。據(jù)統(tǒng)計，我國大約有16款mRNA SARS-CoV-2在研。疫情退去，后續(xù)上市的疫苗還能獲得多大的商業(yè)化價值尚未可知，但布局mRNA疫苗是一個入場mRNA療法這一新興領(lǐng)域的重要步驟。
mRNA疫苗/藥物的工作機制清晰，經(jīng)由脂質(zhì)納米顆粒包裹的mRNA進入體內(nèi)后被細胞所攝取，納米脂質(zhì)顆粒在胞內(nèi)解開后釋放出mRNA，隨后利用體內(nèi)的氨基酸進行自然的蛋白翻譯，從而發(fā)揮其藥物/疫苗功能。mRNA的體外合成制備、保持穩(wěn)定性和細胞內(nèi)遞送是mRNA藥物/疫苗研發(fā)的關(guān)鍵技術(shù)。
圖1 mRNA疫苗/藥物原理
其中合成LNP包裹的mRNA流程大致經(jīng)過模板制備、體外轉(zhuǎn)錄、純化和載體包裹等環(huán)節(jié)：
圖2 LNP-mRNA合成流程
圖3 mRNA合成產(chǎn)品總覽（酶法加帽法）
一、模板制備：
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
abs60251 | 重組高熱穩(wěn)定DNA 聚合酶 | 1000U |
abs44058811 | dNTP Mix (25 mM each) | 250ul |
abs60036 | 2×Taq PCR Mix | 1ml*50 |
abs60034 | 2× Xerox PCR Master Mix | 1ml×5 |
abs60056 | 2×Pfu Master Mix | 1ml×5 |
abs60055 | 2×Pfu Master Mix（Quick Load） | 1ml×5 |
abs60084 | T4 DNA Ligase | 500U×10 |
abs60250 | 快速多片段DNA組裝預(yù)混液 | 50T |
abs60024 | 無內(nèi)毒素高純度質(zhì)粒大量快速提取試劑盒 | 10T |
abs60023 | 無內(nèi)毒素高純度質(zhì)粒小量快速提取試劑盒 | 50T |
二、體外轉(zhuǎn)錄：
分類 | 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
酶產(chǎn)品 | abs60153 | T7 RNA 聚合酶 | 1000KU |
abs60170 | 無機焦磷酸酶 | 100KU | |
abs60172 | 脫氧核糖核酸酶Ⅰ（DNase Ⅰ） | 10000U | |
abs60249 | 重組表達的鼠源RNase抑制劑 | 10000U | |
abs60150 | RNA酶抑制劑 | 40000U | |
核苷酸原料 | abs60159 | ATP Sodium salt solution（100 mM） | 1ml×3 |
abs60163 | CTP Sodium salt solution（100 mM） | 1ml×3 | |
abs60164 | GTP Sodium salt solution（100 mM） | 1ml×3 | |
abs60165 | UTP Sodium salt solution（100mM） | 1ml×3 | |
修飾堿基 | abs60155 | 假尿苷三磷酸四鈉鹽溶液 | 1ml |
abs60156 | N1-甲基-假尿苷三磷酸四鈉鹽溶液 | 1ml | |
abs60168 | 5-甲基-CTP鈉鹽溶液 | 1ml | |
abs60169 | 5-甲氧基-UTP鈉鹽溶液 | 1ml | |
abs60185 | 假尿苷三磷酸四鋰鹽溶液 | 50ul | |
abs60186 | N1-甲基-假尿苷三磷酸四鋰鹽溶液 | 50ul | |
abs60187 | N6-甲基-ATP鋰鹽溶液 | 50ul | |
abs60188 | 5-甲基-CTP鋰鹽溶液 | 50ul | |
abs60189 | 5-甲氧基-UTP鋰鹽溶液 | 50ul |
三、RNA加帽（酶法加帽法）
分類 | 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
酶產(chǎn)品 | abs60153 | T7 RNA 聚合酶 | 1000KU |
abs60166 | 2 氧甲基轉(zhuǎn)移酶 | 50000U | |
abs60152 | 牛痘病毒加帽酶 | 10000KU | |
合成帽結(jié)構(gòu) | abs60182 | Abs Cap AG | 100ul |
abs60183 | Abs Cap GG | 100ul | |
abs60184 | Abs Cap AU | 100ul | |
abs60318 | Abs Cap m6AG | 10ul | |
abs60319 | Abs Cap2 AG | 10ul | |
abs60320 | Abs Cap2 m6AG | 10ul | |
abs60321 | 體內(nèi)天然帽結(jié)構(gòu)類似物組合 | 1kit |
四、RNA純化及檢測
分類 | 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
RNA純化 | abs9259 | 無酶無菌水（DEPC水） | 500ml |
abs7992 | Oligo(dT)18磁珠（1um） | 1ml | |
abs7986 | 羧基磁珠（1um） | 10ml | |
雙鏈RNA 檢測 | abs590002 | 雙鏈RNA（dsRNA）ELISA檢測試劑盒（K1） | 96T |
五、mRNA相關(guān)其他產(chǎn)品推薦
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品特征 |
abs60174 | Cas9 mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60190 | Cas9 nickase mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60176 | EGFP mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60178 | Fluc mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60180 | mcherry mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60192 | EBFP mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60193 | ECFP mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60195 | mBanana mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60196 | mHoneydew mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60197 | mKate mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60198 | mOrange mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60199 | mPlum mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60311 | mtangerine mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60313 | tdTomato mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60314 | YFP mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60191 | Cre mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60194 | EPO mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60312 | OVA mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60315 | β-gal mRNA | 100ug×10 | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60332 | Endless eGFP mRNA | 50ug | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60333 | Endless Fluc mRNA | 50ug | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60334 | Endless mcherry mRNA | 50ug | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60335 | Endless Cas9 mRNA | 50ug | 新鮮現(xiàn)貨 |
abs60336 | Endless EPO mRNA | 50ug | 新鮮現(xiàn)貨 |
備注：所有工具RNA均使用 Cap AG結(jié)構(gòu)共轉(zhuǎn)錄加帽，修飾堿基5種可任選其一（5-Methoxy-UTP，5-Methyl-CTP，N1-Methylpseudo-UTP，N6-Methyl-ATP，Pseudo-UTP。） | |||
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