高分文章來啦! 本期要分享給大家的使用愛必信產(chǎn)品的文章刊登于Nature Methods,影響因子高達(dá)26.9! 小編我已經(jīng)迫不及待了,就讓我們一起來看看文章究竟講了什么吧。
細(xì)胞代謝是一系列重要的維持生命的化學(xué)反應(yīng)的總稱,有細(xì)胞代謝存在,我們才能夠正常的生長發(fā)育、繁殖生存,感受這個多彩的世界。而對于代謝的研究,一直是生命科學(xué)領(lǐng)域重要的分支。
文章闡述了一種iNap NADPH的傳感器,該傳感器是在原楊弋教授團隊發(fā)明的高響應(yīng)熒光探針“SoNar”基礎(chǔ)上改造的。 “SoNar”是第二代細(xì)胞代謝熒光探針,可同時檢測NAD、NADH及其比例,NAD/NADH是一對核心代謝物,是表征細(xì)胞代謝失衡參數(shù),通過對該代謝物的活體監(jiān)測,可以察覺癌細(xì)胞與正常細(xì)胞的微細(xì)代謝差異,為抗癌藥物的篩選提供有力工具。
本文的熒光傳感器是在“SoNar”的基礎(chǔ)上,將配體選擇性從NADH變成NADPH,從而完成對NADPH代謝的活細(xì)胞實時跟蹤。
在細(xì)胞層面,文章探究了巨噬細(xì)胞中的NADPH水平變化。用脂多糖(LPS)和IFN-γ處理過的激活巨噬細(xì)胞的NADPH水平會明顯降低,因為激活后的巨噬細(xì)胞合成一氧化氮,消耗NADPH。通過轉(zhuǎn)染iNAP傳感器,運用流式手段檢測RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞激活后的NADPH水平的變化,顯示出了明顯的下降,這與之前的研究一致,反映了iNAP傳感器的作用。
從這個層面來說,iNAP有可能有助于區(qū)分激活和靜止的巨噬細(xì)胞。
文章在激活巨噬細(xì)胞時,使用了LPS和IFN-γ,其中的重組小鼠IFN-γ正是來自愛必信的產(chǎn)品
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