293細胞是人腎上皮細胞系，包含多種衍生細胞株如AAV293、HEK293、293T、 293F、293A等。由于293細胞以下特點：①.293細胞比較容易轉(zhuǎn)染；②擁有人類所有的翻譯后修飾，能夠產(chǎn)生與人類自然合成的蛋白質(zhì)最相似的蛋白質(zhì)；③.293細胞是用于制藥生產(chǎn)的大規(guī)模培養(yǎng)的理想宿主細胞；④.具有高生長速率、搖瓶中細胞密度高、高效靈活的代謝和遺傳操作等優(yōu)點，是生物治療藥物生產(chǎn)的可行工具；⑤是一種敏感的人類胚胎細胞，具有與早期分化神經(jīng)元相似的特征，在體外更容易受到環(huán)境因素的影響，通常被用作新藥發(fā)現(xiàn)和毒性測試的模型，293細胞被廣泛用于重組治療蛋白、疫苗、抗癌劑和其他臨床相關(guān)藥物的生產(chǎn)研究，因此獲得“工具細胞"、“21世紀最有前途的細胞"等稱號。
圖1 293細胞形態(tài)
表1 293細胞基本信息
細胞名稱 | 293細胞 |
種屬 | 人 |
組織來源 | 胚腎 |
形態(tài)特點 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
傳代周期 | 2-3天 |
培養(yǎng)體系及條件 | DMEM（abs9483）+10%FBS(abs972)；氣相：95%空氣+5%CO?；溫度：37℃ |
凍存條件 | 95%培養(yǎng)基+5%DMSO(abs9187)凍存于液氮 |
愛必信最新推出的RF 293細胞DNA轉(zhuǎn)染試劑可專用于293細胞的質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染陽性率可高達95%以上。特別地，RF 293細胞DNA轉(zhuǎn)染試劑盒擁有極低的細胞毒性，轉(zhuǎn)染細胞24小時后，細胞死亡率僅為5%左右。同時該試劑盒操作十分簡便，先將轉(zhuǎn)染試劑與質(zhì)粒DNA混合，再將轉(zhuǎn)染試劑-DNA復(fù)合物直接加入培養(yǎng)細胞中即可，血清不影響其轉(zhuǎn)染效果，不必刻意添加或更換培養(yǎng)液。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 試劑盒組成 | 規(guī)格 |
abs60369 | RF 293細胞DNA轉(zhuǎn)染試劑盒 | RF 293、Trans buffer | 0.5/1.5mL |
細胞轉(zhuǎn)染性能： 可高效轉(zhuǎn)染293細胞，包括AAV293 、HEK293、293T、293F、293A，轉(zhuǎn)染效率可高達95%。
極低的細胞毒性：使用可降解生物材料，細胞毒性低，轉(zhuǎn)染細胞死亡率在5%左右，大大降低了因細胞毒性對實驗結(jié)果的影響，實驗結(jié)果更為客觀。
操作簡便：可用于含血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞的轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染前后不需要更換培養(yǎng)液。
圖2 RF 293細胞DNA轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染pEGFP-C2質(zhì)粒到AAV-293細胞，綠色熒光蛋白的表達情況
1、轉(zhuǎn)染前的細胞匯合度以60-70%為宜，轉(zhuǎn)染時細胞生長狀態(tài)應(yīng)保持良好，不要有支原體污染。
2、轉(zhuǎn)染，建議進行優(yōu)化實驗，如24孔培養(yǎng)板，每孔質(zhì)粒用量0.8 ug，轉(zhuǎn)染試劑用量可選擇2.0 ul、2.5 ul、3.0 ul進行優(yōu)化。
3、應(yīng)避免轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備體系中存在血清，因血清會干擾RF 293質(zhì)粒與DNA形成復(fù)合物，培養(yǎng)基中盡量不要使用抗生素。
4、對于24孔板，轉(zhuǎn)染前一天接種的細胞量以1.5-2.5X105個/孔為宜，建議研究者進行適當?shù)膬?yōu)化。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
abs47047834 | 胰酶 | 100g/500g |
abs961 | 10×PBS緩沖液 | 500ml/500ml×10 |
abs9483 | 高糖 DMEM 培養(yǎng)基（含 L-谷氨酰胺和丙酮酸鈉） | 500ml/500ml×10 |
abs972 | 胎牛血清(優(yōu)級) | 125ml/500ml |
abs9187 | 二甲基亞砜(DMSO)(細胞培養(yǎng)級) | 50mL |
abs7004 | 細胞培養(yǎng)皿（35mm） | 500個/箱 |
abs7005 | 細胞培養(yǎng)皿（60mm） | 500個/箱 |
abs7003 | 細胞培養(yǎng)皿（100mm） | 500個/箱 |
abs7033 | 標準透明6孔細胞培養(yǎng)板 | 50個/盒 |
abs7034 | 標準透明12孔細胞培養(yǎng)板 | 50個/箱 |
abs7035 | 標準透明24孔細胞培養(yǎng)板 | 50個/盒 |
abs7040 | 標準透明48孔細胞培養(yǎng)板 | 50個/箱 |
abs7036 | 標準透明96孔細胞培養(yǎng)板 | 50個/盒 |
abs7119 | 1.5ml離心管（無菌無酶） | 500支/盒,10盒/箱 （1袋/盒） |
Absin特色產(chǎn)品線：
WB相關(guān)：ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠；IHC相關(guān)：二抗試劑盒、組化筆；IP/CoIP試劑盒；激動劑/抑制劑；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡試劑盒；呼吸爆發(fā)試劑盒；ELISA試劑盒；重組蛋白；抗體: 二抗、標簽抗體、對照抗體；定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...
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