Western一抗二抗去除液又稱膜再生液或Western抗體洗脫液(Stripping buffer)，用于Western中轉(zhuǎn)移了蛋白的膜的重復利用。在Western中完成了一抗二抗結(jié)合和后續(xù)的化學發(fā)光檢測后，有時還需要檢測GAPDH、β-actin等表達量相對穩(wěn)定的管家蛋白或其它蛋白作為參照。Stripping buffer可以洗脫一抗二抗，非常方便地重新利用使用過的膜，檢測其它蛋白。 Stripping buffer多次重復使用同一張膜，會導致蛋白信號的減弱不宜重復利用膜，一般可以利用2～3次。
通過使用一抗二抗去除液，充分去除一抗二抗，可以非常方便地重新利用使用過的膜檢測其它蛋白。和重新跑一個 SDS-PAGE 膠相比，不僅省時省力，而且可以消除重新上樣而帶來的誤差，使可比性更強。
主要依靠堿性來解除一抗二抗的結(jié)合，同時又不會導致轉(zhuǎn)移到膜上的蛋白的損失， 適用于Western化學發(fā)光檢測后的蛋白膜的重復利用，尤其適用于PVDF膜，其次為硝酸纖維素膜。非化學發(fā)光試劑進行的Western檢測(如DAB，NBT/BCIP)不適用于本試劑。
注意事項：
1、使用辣根過氧化物酶標記的抗體時，封閉液必須使用5%脫脂奶粉配制。使用堿性磷酸酯酶標記的抗體時，封閉液必須使用酪蛋白(casein)配制。
2、特別適用于PVDF膜的再生，硝酸纖維素膜的再生效果不如PVDF膜。
3、適用于ECL等類似的化學發(fā)光液的檢測后的一抗二抗洗脫。非化學發(fā)光試劑進行的Western檢測(如DAB，NBT/BCIP)不適用于本試劑。
4、有輕微腐蝕性，使用時請注意防護。
5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
9
化工儀器網(wǎng)