目錄:愛必信（上海）生物科技有限公司>>生化試劑>>植物提取物>> abs60256PM原代細胞質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染試劑盒
| CAS | - | 純度 | - |
|---|---|---|---|
| 分子量 | - | 分子式 | - |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 0.1ml;0.5ml;1.0ml;1.5ml |
| 貨號 | abs60256 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 專門用于原代細胞質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染試劑 |
產(chǎn)品介紹：
這款產(chǎn)品是在Plasmid DNA Transfection Reagent的基礎(chǔ)上進一步優(yōu)化研發(fā)成功的專門用于原代細胞質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染試劑。它具有非常好的轉(zhuǎn)染性能，可高效轉(zhuǎn)染多種原代細胞，轉(zhuǎn)染效率高達70%以上（EGFP質(zhì)粒）。與目前市場上常見的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑不同，這款產(chǎn)品采用生物可降解材料配制，對細胞的毒性很低，轉(zhuǎn)染后細胞死亡率不到10%。使用也非常方便，先將轉(zhuǎn)染試劑與質(zhì)粒DNA混合，再將轉(zhuǎn)染試劑-DNA復(fù)合物直接加入培養(yǎng)細胞中，血清不影響其轉(zhuǎn)染效果，不必刻意添加或更換培養(yǎng)液，操作十分簡便。
產(chǎn)品特點
1、強大的細胞轉(zhuǎn)染性能：可高效轉(zhuǎn)染多種原代細胞，轉(zhuǎn)染效率可高達85%以上；
2、 極低的細胞毒性：使用可降解生物材料，細胞毒性低，轉(zhuǎn)染細胞死亡率不到10%，大大降低了因細胞毒性對實驗結(jié)果的影響，實驗結(jié)果更為客觀；
3、操作簡便，可用于含血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞的轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染前后不需要更換培養(yǎng)液。
方法步驟（以24孔板轉(zhuǎn)染為例）:
A、細胞接種:
1、轉(zhuǎn)染前24小時左右對細胞進行轉(zhuǎn)接，培養(yǎng)過夜；
2、確保轉(zhuǎn)染時細胞密度為90%左右；
3、最好在轉(zhuǎn)染開始之前更換新鮮的含血清培養(yǎng)基，以防轉(zhuǎn)染后孵育 階段細胞密度太大、營養(yǎng)不足導(dǎo)致細胞死亡。
B、PM /DNA轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備(該步完成后應(yīng)立即進行轉(zhuǎn)染):
1、在1.5 ml無菌離心管中加入50µl Trans buffer，再加入適量的轉(zhuǎn)染 試劑，見附表。用移液器輕輕混勻后在室溫靜置5分鐘。
2、在1.5 ml無菌離心管中加入50µl Trans buffer，輕輕混勻，再加入適量的DNA，見附表。用移液器再次輕輕 混勻后在室溫靜置5分鐘。
3、將DNA-Trans buffer合物滴加至PM-Trans buffer混合物中，用移液器輕輕混勻后在室溫靜置15~20分后，立即轉(zhuǎn)染。注意： PM-Trans buffer混合物和DNA-Trans buffer混合物的混合次序非常重要，切勿顛倒。
注意：離心管最好使用聚丙烯離心管。
C、轉(zhuǎn)染:
1、將步驟B制備的轉(zhuǎn)染復(fù)合物滴加至培養(yǎng)基中，邊加邊輕輕晃動培養(yǎng)板以使復(fù)合物均勻分布。加完后，立即將培養(yǎng)板轉(zhuǎn)入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
2、培養(yǎng)12小時后即可觀察，最佳觀察或收獲時間為24~48小時。
3、PM在培養(yǎng)基中仍有較高的轉(zhuǎn)染效率，因此轉(zhuǎn)染前后不需要換成無血清或低血清培養(yǎng)基。如果轉(zhuǎn)染后需要更換新鮮培養(yǎng)基，請于加入PM /DNA復(fù)合物12~24小時后進行。
附表：不同培養(yǎng)體系推薦初始轉(zhuǎn)染條件
| 培養(yǎng)皿 | 96 孔板 | 48 孔板 | 24 孔板 | 12 孔板 | 6 孔板 | 10cm 皿 | |
| 表面積cm2 | 0.35 | 1.0 | 1.9 | 3.8 | 9.6 | 59 | |
| Trans buffer、試劑、DNA 量 | Trans buffer(μl) | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 | 2000 |
| PM(μl) | 0.5 | 1.3 | 2.5 | 5 | 10 | 50 | |
| 1μg/μl plasmid (μl) | 0.16 | 0.4 | 0.8 | 1.6 | 3.2 | 16 | |
| 培養(yǎng)基(ml) | 0.1 | 0.25 | 0.5 | 1.0 | 2.0 | 10 | |
儲存/保存方法：
-20℃避光保存，Trans buffer 可保存于2-8°C，有效期1年，使用前輕輕混勻。
試劑盒包裝：
| 貨 號 | PM試劑 | Trans buffer |
| abs60256-0.1ml | 0.1ml | 4ml |
| abs60256-0.5ml | 0.5ml | 20ml |
| abs60256-1.0ml | 1.0ml | 40ml |
| abs60256-1.5ml | 1.5ml | 60ml |
產(chǎn)品用途：
大鼠肝細胞、血管平滑肌細胞、血管內(nèi)皮細胞、肺泡上皮細胞、乳腺癌細胞、肺癌細胞、大腸癌細胞、肝癌細胞等。
* 注意： 本產(chǎn)品僅用于科研實驗
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