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小鼠β防御素elisa檢測試劑盒試劑?配制

閱讀:218          發(fā)布時間:2021-7-28

小鼠β防御素elisa檢測試劑盒試劑配制:

1、小鼠β防御素elisa檢測試劑盒說明書酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。

2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。

3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)

7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)

8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

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【實驗用途】β-Defensin,β-防御素。β-Defensin是一種富含半胱氨酸陽離子多肽,含有 6個穩(wěn)定的半胱氨酸,分別以 l-6,2-4,3一5連接形成三個分子的二硫鍵,構成穩(wěn)定的反相平行的三股β一片層結構。二流鍵可以使小分子防御素緊密聯(lián)結以防御蛋白酶水解,所以在富含蛋白的吞噬溶酶體環(huán)境中仍能保持其特性,這也是防御素區(qū)別與其他抗微生物肽的主要因素。pBD-1除上述結構外,還含有2個精氨酸、7個賴氨酸,且在成熟的肽中不含有陰離子殘基。預先包被的β-Defensin(β-防御素)抗體為多克隆β-Defensin(β-防御素)抗體。檢測相β-Defensin(β-防御素)抗體也為多克隆β-Defensin(β-防御素)抗體,經生物素(biotin)標記。樣品和生物素標記β-Defensin(β-防御素)抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。

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