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技術(shù)文章

豬乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒洗滌方法

閱讀:190          發(fā)布時(shí)間:2021-9-15

豬乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒洗滌方法:

1. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時(shí),均需充分混勻,并盡量避免起泡。

1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.棄去液體,甩干,每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時(shí)。

3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時(shí)。

5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長(zhǎng),但不可超過(guò)30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí),即可終止)。

7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開(kāi)酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測(cè)程序。

9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。

長(zhǎng)鏈烯脂酰輔酶A水化酶抗體

神經(jīng)元,肌肉特異性烯醇化酶抗體

內(nèi)皮分化型G蛋白偶聯(lián)受體3抗體

發(fā)育相關(guān)蛋白ERCC6L抗體

豬源產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌K99抗體

α內(nèi)磺肽抗體

磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體

表皮生長(zhǎng)因子樣激素受體1抗體

CREB結(jié)合蛋白p300抗體

EB病毒LMP-2A蛋白抗體

EB病毒核抗原抗體1抗體

磷酸化雌激素受體β抗體

磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體

磷酸化4E結(jié)合蛋白1,2,3抗體

Epsin2B蛋白抗體

表皮生長(zhǎng)因子抗體

表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白8抗體

E3泛素連接酶抗體

小鼠抗表皮生長(zhǎng)因子抗體

抗表皮生長(zhǎng)因子抗體

內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪氨酸激酶A2+A3+A4抗體

磷酸化內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪氨酸激酶A2+A3+A4抗體

磷酸化內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪氨酸激酶A3+A4+A5抗體

轉(zhuǎn)錄因子Ets差異基因5抗體

E選擇素抗體


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