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技術(shù)文章

秋行軍蟲卵巢細胞Sf9克隆株細胞培養(yǎng)操作規(guī)程

閱讀:234          發(fā)布時間:2022-10-12

秋行軍蟲卵巢細胞Sf9克隆株細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標簽)

重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 標簽)

重組小鼠 CCL17 / TARC 蛋白

重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (His 標簽)

重組人 CCL21 / 6Ckine 蛋白

重組人 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白

重組小鼠 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白

重組食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (Fc 標簽)

重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 標簽)

重組食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 (His 標簽)

重組小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 (His 標簽)

重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標簽)

重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白

重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113, His 標簽)

重組小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 標簽)

重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 (His 標簽)

重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & SUMO 標簽)

重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽)

重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標簽)

重組小鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標簽)

重組人 CCL5 / RANTES 蛋白 (His & mucin 標簽)

重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77)


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