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雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸ELISA試劑盒操作步驟
閱讀：107 發(fā)布時間：2023-4-19雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸ELISA試劑盒操作步驟：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
硫氧還蛋白氧化還原酶（TrxR）測試盒可見分光光度法50管/48樣
γ-谷氨酰半胱氨酸連接酶（GCL）測試盒可見分光光度法50管/48樣
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)活性測試盒可見分光光度法50管/48樣
抗壞血酸（AsA）含量測試盒紫外分光光度法50管/48樣
脫氫抗壞血酸（DHA）含量測試盒紫外分光光度法50管/48樣
L-半乳糖苷-1,4-內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)測試盒可見分光光度法50管/48樣
抗壞血酸氧化酶（AAO）活性測試盒可見分光光度法50管/48樣
抗壞血酸過氧化物酶（APX）測試盒紫外分光光度法50管/48樣
單脫氫抗壞血酸還原酶（MDHAR）測試盒紫外分光光度法50管/48樣
脫氫抗壞血酸還原酶（DHAR）活性測試盒紫外分光光度法50管/48樣
過氧化氫（H2O2）測試盒可見分光光度法50管/48樣
丙二醛（MDA）測試盒可見分光光度法50管/48樣
葡萄糖氧化酶（GOD）測試盒可見分光光度法50管/48樣
多酚氧化酶(PPO）測試盒可見分光光度法50管/24樣
蛋白質(zhì)羰基測試盒紫外分光光度法50管/24樣
二胺氧化酶測試盒可見分光光度法50管/24樣
超氧陰離子測試盒可見分光光度法50管/24樣
超氧化物歧化酶（SOD）測試盒可見分光光度法50管/48樣