即用型高保真PCR試劑盒確保試劑盒測(cè)定的專(zhuān)一性、靈敏度、重復(fù)性和回收率。并且提供樣本檢測(cè)服務(wù)。誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)，價(jià)格實(shí)惠，服務(wù)周到，質(zhì)量保障！提供各種實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)。歡迎廣大科研用戶(hù)！

即用型高保真PCR試劑盒原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

特異性強(qiáng)

　　PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

　　①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

　?、趬A基配對(duì)原則；

　?、跿aq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

   ④靶基因的特異性與保守性。

產(chǎn)品名稱(chēng)	規(guī)格	貨號(hào)
即用型高保真PCR試劑盒	1.5mL	GOY-P4021

 

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。

特點(diǎn) ：

本試劑盒可用于檢測(cè)食品或其他材料中是否有的成分?，F(xiàn)代食品加工工藝改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質(zhì)地等特性，因此傳統(tǒng)的感官鑒別技術(shù)已經(jīng)無(wú)法對(duì)食材的真?zhèn)芜M(jìn)行準(zhǔn)確的鑒定。同時(shí)部分食材還有致敏性，因此基于基因檢測(cè)的快速靈敏的食材來(lái)源檢測(cè)技術(shù)將對(duì)食品監(jiān)管和安全提供重要的保障。本產(chǎn)品就是為滿(mǎn)足這一需求根據(jù) PCR 原理開(kāi)發(fā)的產(chǎn)品，它具有下列特點(diǎn)：

1. 一管式操作，用戶(hù)只需要提供樣品即可。

2. 根據(jù)大豆熱休克蛋白基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)引物，能專(zhuān)一性檢測(cè)出樣品中的大豆成分，但不能檢測(cè)其他非大豆成分。

3. 快速，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程（按一個(gè)樣品計(jì)）所需時(shí)間僅為 2.0 小時(shí)。

4. 只需要普通 PCR 儀和凝膠電泳儀，無(wú)需配置貴重儀器設(shè)備。

5. 對(duì)混合樣品中大豆成分的檢測(cè)下限為 0.1%，對(duì)樣品中大豆成分的核酸檢測(cè)下限為 1.0ng/μL。

6. 本只能用于科研，足夠 50 次 40uL 體系的常規(guī) PCR。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：

    1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。

    2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。

    3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。

    4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。

    5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

    6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。

反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

natural resistance-associated macrophage protein 2,NRAMP2 ELISA kit雞ACTH elisa檢測(cè)試劑盒Xanthyletin

natural resistance-associated macrophage protein 1,NRAMP-1 ELISA kit雞ACV-A elisa檢測(cè)試劑盒Diversoside

activating transcription factor-1,ATF-1 ELISA Kit雞ACV-AB elisa檢測(cè)試劑盒Chalepensin

SOX5 ELISA Kit雞ACV-B elisa檢測(cè)試劑盒Hydramicromelin D

SOX4 ELISA Kit雞ADM elisa檢測(cè)試劑盒7-Prenyloxycoumarin

TGFBR3 ELISA Kit雞ALT elisa檢測(cè)試劑盒Ammajin

transforming growth factor β receptor 2,TGF-βR2 ELISA kit雞AmAC-1 elisa檢測(cè)試劑盒Hydramicromelin B

TGFBR1 ELISA Kit雞ANG-Ⅰ elisa檢測(cè)試劑盒Demethylluvangetin

TSC22 ELISA Kit雞ANG-Ⅱ elisa檢測(cè)試劑盒3-(1,1-Dimethylallyl)-8-hydroxy-7-methoxycoumarin

Transforming Growth factor β3,TGF-β3 ELISA kit雞AP-1 elisa檢測(cè)試劑盒Matsukaze-lactone

TGF β2 ELISA Kit雞AST elisa檢測(cè)試劑盒5,6,7-Trimethoxycoumarin

TGF-β1 ELISA kit雞AT-Ⅲ elisa檢測(cè)試劑盒Thamnosmonin

TGF-α ELISA Kit雞ATGL elisa檢測(cè)試劑盒Hymexelsin

transglutaminase 2C polypeptide,TGM2 ELISA Kit雞BF elisa檢測(cè)試劑盒6′′-O-β-D-Apiofuranosylapterin

HLA-DQA2 ELISA Kit雞bFGF elisa檢測(cè)試劑盒6-(3-Methyl-2-oxobutyroyl)-7-methoxycoumarin

Cyclin Dependent Kinase 5,CDK5 ELISA Kit雞BSA elisa檢測(cè)試劑盒6-Hydroxycoumurrayin
即用型高保真PCR試劑盒RPS6KB1(Ser441+Thr444)  磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體規(guī)格 0.1ml

RPS6KB1(Ser434)  磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體規(guī)格 0.1ml

RPS6KB1(Ser427)  磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體規(guī)格 0.1ml

RPS6KB1(Ser421)  磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體規(guī)格 0.1ml

RPS6KB1(Ser417)  磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體規(guī)格 0.1ml

RPS6KA1(Thr359)  磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體規(guī)格 0.1ml

RPS6KA1(Thr348)  磷酸化磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體規(guī)格 0.1ml
使用方法：

注：所有試劑使用前需*解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1.樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū)；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。

2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）

取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。

組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。