詳細介紹
反應五要素:
非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
?
自備物品:
非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
雜交袋 100個/包15cm×25cm包
鏈霉親和素-FITC1ml支
Gentamycin Sulfate 硫酸慶大霉素500mg支
Tryptone 胰蛋白胨500g瓶
Decyl alcohol 1-癸醇112-30-1100mg
Novobiocin Sodium Salt 新生霉素250mg瓶
anti-α-Tubulin Rabbit Polyclonal Antibody100ul瓶
2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二甲酸二鈉 BCA1g瓶
Guanylic acid 鳥苷酸25g瓶
Palmitic acid 棕櫚酸-十六烷酸2109620mg
Fluorescein isothiocyanate 異硫氰酸熒光素100mg瓶
非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用大腸桿菌&大腸菌顯色培養(yǎng)基 進口、國產(chǎn) 1升 E.Coli&Coliform Chromogenic Medium 同時檢測大腸菌和大腸桿菌,培養(yǎng)24小時,大腸桿菌顯紫色,大腸菌顯紅色
嗜鉻粒素A抗原 CGA(Chromogranin A) * 規(guī)格: 0.5mg
成人真皮成纖維細胞 規(guī)格: 5 × 105次方(1ml)
緩沖 MUG 瓊脂 2000ml/瓶 用于濾膜法測定大腸桿菌*
Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒 * 10ml*2 用于吲哚(靛基質(zhì))試驗配套試劑
改良 Camp-BAP 瓊脂基礎添加劑 2 1ml×10 支/盒 *
緩沖MUG瓊脂 (BMA) * 100(g)
抗生素檢定培養(yǎng)基8號 * 250(g)
卵黃甘露醇高鹽瓊脂基礎 進口、國產(chǎn) 250克 Egg-Yolk Mannitol Salt Agar Base 金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)
真皮成纖維細胞 規(guī)格: 5 × 105次方(1ml)
卵黃高鹽瓊脂基礎 進口、國產(chǎn) 用于生物制品金黃色葡萄球菌選擇性分離 Egg-Yolk Salt Agar Base 250