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詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
非洲豬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒科研用參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
非洲豬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒科研用使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 分類(lèi) |
非洲豬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒科研用 | 50T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、非洲豬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒科研用樣本采集：各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
非洲豬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒科研用15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
非洲豬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒科研用14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀釋液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
雜交袋 100個(gè)/包15cm×25cm包
鏈霉親和素-FITC1ml支
Gentamycin Sulfate 硫酸慶大霉素500mg支
Tryptone 胰蛋白胨500g瓶
Decyl alcohol 1-癸醇112-30-1100mg
Novobiocin Sodium Salt 新生霉素250mg瓶
anti-α-Tubulin Rabbit Polyclonal Antibody100ul瓶
2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二甲酸二鈉 BCA1g瓶
Guanylic acid 鳥(niǎo)苷酸25g瓶
Palmitic acid 棕櫚酸-十六烷酸2109620mg
Fluorescein isothiocyanate 異硫氰酸熒光素100mg瓶
非洲豬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒科研用大腸桿菌&大腸菌顯色培養(yǎng)基 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 1升 E.Coli&Coliform Chromogenic Medium 同時(shí)檢測(cè)大腸菌和大腸桿菌，培養(yǎng)24小時(shí)，大腸桿菌顯紫色，大腸菌顯紅色
嗜鉻粒素A抗原 CGA(Chromogranin A) * 規(guī)格: 0.5mg
成人真皮成纖維細(xì)胞 規(guī)格: 5 × 105次方（1ml）
緩沖 MUG 瓊脂 2000ml/瓶 用于濾膜法測(cè)定大腸桿菌*
Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒 * 10ml*2 用于吲哚（靛基質(zhì)）試驗(yàn)配套試劑
改良 Camp-BAP 瓊脂基礎(chǔ)添加劑 2 1ml×10 支/盒 *
緩沖MUG瓊脂 (BMA) * 100(g)
抗生素檢定培養(yǎng)基8號(hào) * 250(g)
卵黃甘露醇高鹽瓊脂基礎(chǔ) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 250克 Egg-Yolk Mannitol Salt Agar Base 金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)
真皮成纖維細(xì)胞 規(guī)格: 5 × 105次方（1ml）
卵黃高鹽瓊脂基礎(chǔ) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 用于生物制品金黃色葡萄球菌選擇性分離 Egg-Yolk Salt Agar Base 250
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