詳細介紹
細胞實驗步驟:
一、細胞復蘇
1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺,紫外燈照射30min后再通風30min;
2.預熱培養(yǎng)基;
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
4.將凍存細胞從液氮罐中取出;
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化;
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中;
8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中;
9.1000r/min,離心5min;
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
11.吸棄上清液;
12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞,將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內(nèi),補加適量培養(yǎng)基,輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻,并做好標記;
13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài);
14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 人原代臍靜脈內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
產(chǎn)品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 | 貨號 | GOY-XP3141 |
人原代臍靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人原代臍靜脈內(nèi)皮細胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代臍靜脈內(nèi)皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人原代臍靜脈內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代內(nèi)皮細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代內(nèi)皮細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 終濃度10% | -20℃、避光 |
注意事項:
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部;這部分有害物質的濃度和危害性都較低,如有接觸,立即用自來水沖洗即可。
細胞培養(yǎng)步驟:
?細胞復蘇?:
從液氮罐中取出凍存細胞,迅速放入37℃水浴中解凍。
解凍后,將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,輕輕搖動使細胞均勻分布。
放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞換液?:
吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。
加入PBS緩沖液,輕輕漂洗細胞,以去除懸浮在細胞表面的碎片,重復幾次。
加入新的培養(yǎng)基。
?細胞傳代?:
當細胞長到80%~90%時,進行傳代。
吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加入PBS緩沖液漂洗。
加入消化液,輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。
將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,觀察細胞變化。當細胞間隙增大后,加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。
吹打細胞使其成為懸液,轉移到離心管中離心。
棄上清,加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。
按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,補加新鮮培養(yǎng)基。
做好標記,放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞凍存?:
選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。
將細胞轉移到離心管中離心,棄上清。
加入適量的凍存液(如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO),輕輕吹打重懸細胞。
將細胞轉移到冷凍保存管中,標記后放入程序降溫盒,再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Ghrelin 28 腦腸肽28 0.5mgGhrelin 28 腦腸肽28
AGER Protein Human 重組人 AGER / RAGE 蛋白 (His 標簽)
IL13RA1重組大鼠 IL13RA1 蛋白 Protein
CXADR Protein Mouse 重組小鼠 CXADR 蛋白 (His 標簽)
FCGR2B重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽), Biotinylated Protein
小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA 試劑盒
Rat ai IgE receptor aibody ELISA Kit 大鼠抗IgE受體抗體試劑盒
Humanfetalhemoglobin,HBFELISAKit 人胎兒血紅蛋白(HBF)試劑盒 進口分裝
Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2,AFP-L2試劑盒人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)試劑盒
植物氨含量熒光定量試劑盒20次
Mouse16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit小鼠16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒
植物血球凝集素M 10mg
PHA-M 25mg
吩嗪甲酯 1g
PhenMethosulfate 5g
豬B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA 試劑盒
Human ai monocyte aibody (AMA) ELISA Kit 人抗單核細胞抗體(AMA)試劑盒
Porcinetelomerase,TEELISAKit 豬端粒酶(TE)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAGPA/PCA(Humanai-gasicparietalcellaibody)ELISAKit人抗胃壁細胞抗體
血液人類巨細胞病毒蛋白酶(HCMVPROTEASE)活性熒光淬滅法定量試劑盒20次
Mouseansforminggrowthfactorβ2,TGFβ2ELISAKit小鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)試劑盒
1號染色體開放閱讀框130抗體
單羧酸轉運蛋白5抗體
人原代臍靜脈內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基IL13RA1重組大鼠 IL13RA1 蛋白 Protein
Ghrelin 28 腦腸肽28 0.5mgGhrelin 28 腦腸肽28
FCGR2B重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽), Biotinylated Protein
AGER Protein Human 重組人 AGER / RAGE 蛋白 (His 標簽)
CXADR Protein Mouse 重組小鼠 CXADR 蛋白 (His 標簽)