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詳細介紹
兔原代脂肪細胞專用培養(yǎng)基
產(chǎn)品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 100mL/500mL |
貨號 | GOY-XP3137 |
兔原代脂肪細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持兔原代脂肪細胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代脂肪細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于兔原代脂肪細胞的培養(yǎng)。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代脂肪細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代脂肪細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 50ml | 終濃度10% | -20℃、避光 |
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。
| 儀器 | 試劑 | 耗材 |
| 離心機 | 胎牛血清（FBS） | 離心管（15ml、50ml） |
| 生物安全柜 | 無菌 1×PBS pH=7.2 | T-25 細胞培養(yǎng)瓶 |
| 電動移液器 | 0.25%+0.02%EDTA | 一次性無菌移液管（2ml、5ml、10ml） |
| CO2 培養(yǎng)箱 | 培養(yǎng)基（含血清） | 1.8mL 凍存管 |
| 倒置顯微鏡 | 凍存液：90%FBS+10%DMSO | 程序降溫盒 |
復(fù)蘇
1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；
2) 準備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；
3) 戴上護目鏡，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中
復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率；
4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中，混勻后，1000rpm 離心 5min；
5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細胞名稱、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；
6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入
CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。
傳代 （細胞傳代建議一傳二）
1) 當細胞匯合度達到 85%以上時，可進行傳代。
2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；
3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；
4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；
5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管；
① 準備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；
② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細胞脫。
6) 1000rpm 離心 5min；
7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基。
8) 離心完成后，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞，將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；
9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）
1）~6）參照傳代步驟
7）離心完成后，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；
8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；
9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。
?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服、鞋套，戴口罩、手套。
?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。
?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染，使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。
?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。
?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。
?定期檢測?：定期對細胞進行支原體、細菌、真菌等污染檢測。
SDF-1/CXCL12 基質(zhì)細胞衍生因子1 0.5mgSDF-1/CXCL12 基質(zhì)細胞衍生因子1
AMBP Protein Human 重組人 AMBP / Alpha 1 microglobulin 蛋白 (His 標簽)
HA重組甲型流感 H10N3 (A/duck/Hong Kong/786/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽) Protein
IL1RAPL2 Protein Human 重組人 IL-1R9 / IL1RAPL2 蛋白
CA10重組人 Carbonic Anhydrase X / CA10 蛋白 (His 標簽) Protein
小鼠酶2(CA-2)ELISA 試劑盒
Rat activated protein C (APC) ELISA Kit 大鼠活化蛋白C(APC)試劑盒
HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21BELISAKit 人細胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)試劑盒 進口分裝
Cobravenomfactor,CVF試劑盒毒蛇因子(CVF)試劑盒
載玻片細胞鈣ATP酶SERCA蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mouseendotoxin,ETELISAKit小鼠內(nèi)毒素(ET)試劑盒
豬α葡萄糖苷酶（α-Glu）試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬α干擾素(IFN-α)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬α干擾素(IFN-α)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬S-100B蛋白（S-100B）試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬膽囊收縮素/腸促肽(CCK)ELISA 試劑盒
Human macrophage colony stimulating factor (M-CSF) ELISA Kit 人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)試劑盒
Porcinemelanomametastasissurfaceadhesionmolecule,MMSAMELISAKit 豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAlpha1-MGELISAKit大鼠α1微球蛋白
血液0酸二酯酶1(PDE1)活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量試劑盒10次
Mouseβ-galactosidase,βGALELISAKit小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)試劑盒
組蛋白去乙酰化酶2單克隆抗體
成纖維細胞生長因子受體3抗體
兔原代脂肪細胞專用培養(yǎng)基HA重組甲型流感 H10N3 (A/duck/Hong Kong/786/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽) Protein
SDF-1/CXCL12 基質(zhì)細胞衍生因子1 0.5mgSDF-1/CXCL12 基質(zhì)細胞衍生因子1
CA10重組人 Carbonic Anhydrase X / CA10 蛋白 (His 標簽) Protein
AMBP Protein Human 重組人 AMBP / Alpha 1 microglobulin 蛋白 (His 標簽)
IL1RAPL2 Protein Human 重組人 IL-1R9 / IL1RAPL2 蛋白
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