詳細介紹
反應五要素:
變異變形桿菌PCR檢測試劑盒多少錢參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
變異變形桿菌PCR檢測試劑盒多少錢 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
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自備物品:
變異變形桿菌PCR檢測試劑盒多少錢15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
SGC7901(人胃細胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H2087(人非小細胞肺腺細胞)5×106cells/瓶×2
NEC(人食管細胞)5×106cells/瓶×2gersion
A875(人黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2
LX-2, 人肝星形細胞株
HuH-6(人肝母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
HCT-8(人盲腸腺細胞)5×106cells/瓶×2
中分子量單一蛋白Marker(45 kD)50次國產(chǎn)
CC-801全細胞裂解液100ug100ug
小鼠黑色素瘤細胞英文名稱:b16
水解酪蛋白(酸)/酸水解酪蛋白/酸水解干酪素/Casein acid hydrolysateBR250/1000克國產(chǎn)/進口
變異變形桿菌PCR檢測試劑盒多少錢甲基橙皮苷 英文名稱 Methyl Hesperidin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 97%
鹽酸環(huán)侖特羅 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: UV法含量測定
頭孢酮S異構體 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 檢查
重樓皂苷 Ⅱ 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
人胎盤泌乳素(HPL) 英文名稱 免疫測定用 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
龍血素B 英文名稱 Loureirin B 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥98.0%
降纖酶 英文名稱 標準品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 效價測定
蛻皮甾酮 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
色氨酸 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
洛美沙星 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
山梨醇 英文名稱 供檢查用 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: